- 彭美兰;王璐;刘丽丽;闫振鹏;阎婷;
目的 探讨外泌体来源的miR-1246对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)转移和自噬的影响。方法 用外泌体提取试剂盒提取ESCC细胞外泌体,电镜观察形态,纳米粒径分析仪检测粒径,Western blot法检测外泌体标志物TSG101和Calnexin的表达情况。对ESCC细胞与正常食管上皮细胞外泌体进行RNA测序,分析差异表达微小核糖核酸(microRNA,miRNA),并对差异表达miRNA进行KEGG Pathway富集分析。通过转录组测序评价155例ESCC患者的癌组织和癌旁组织中miR-1246的表达水平。Transwell小室试验检测miR-1246对ESCC细胞迁移能力的影响;Western blot法检测miR-1246对ESCC细胞自噬的影响。结果 ESCC细胞来源的外泌体形状完整,近似球形囊泡样结构;粒径为50～80 nm;外泌体标志物TSG101蛋白呈阳性,Calnexin蛋白呈阴性。ESCC细胞与正常食管上皮细胞外泌体有59个共同差异表达miRNA,外泌体miR-1246在ESCC细胞中呈高表达,差异表达miRNA主要富集在自噬代谢通路上。外泌体miR-1246在ESCC患者的癌组织中呈高表达。过表达miR-1246可显著促进ESCC细胞的迁移和自噬(t分别为4.119和48.150,P分别<0.05和<0.001),抑制表达miR-1246可抑制ESCC细胞的迁移和自噬(t分别为9.067和51.270,P分别<0.01和<0.001)。结论 外泌体来源的miR-1246可显著影响ESCC细胞的转移和自噬。
2023年10期 v.36 1158-1165页 [查看摘要][在线阅读][下载 1150K] [下载次数：113 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：99 ] - 石飞;霍晓雪;徐建国;
目的 研究长链非编码RNA(LncRNA)生长停滞特异性转录子5(growth arrest specific transcript 5,GAS5)负调控核仁磷酸蛋白1(nucleophosmin 1,NPM1)对胃癌细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药性的影响。方法 选取正常人胃黏膜细胞系GES-1和人胃癌细胞系BG3-823、MGC-803、AGS作为研究对象,qRT-PCR法检测各细胞中LncRNA GAS5水平。诱导AGS细胞DDP耐药(AGS/DDP)后,将实验分为对照组、空质粒组(BC组)、GAS5无义干扰组(pLJM-GAS5NC组)、GAS5过表达组(pLJM-GAS5组),MTT法检测DDP对AGS、AGS/DDP细胞增殖能力的影响;Western blot法检测AGS、AGS/DDP细胞中NPM1、多药耐药基因1 (multidrug resistance 1,MDR1)、耐药基因切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complementation group 1,ERCC1)、多药耐药相关蛋白1 (multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)、神经性钙黏附素(N-cadherin)水平。结果 与人正常胃黏膜GES-1细胞相比,人胃癌BG3-823、AGS细胞中LncRNA GAS5水平明显降低,其中AGS细胞中LncRNA GAS5水平最低,因此选择AGS细胞进行后续试验。与对照组相比,BC和pLJM-GAS5 NC组AGS细胞中LncRNA GAS5水平明显降低,NPM1、MDR1、ERCC1、MRP1、N-cadherin水平显著升高;与BC组和pLJM-GAS5 NC组相比,pLJM-GAS5组AGS/DDP细胞中LncRNA GAS5水平显著升高,NPM1、MDR1、ERCC1、MRP1、N-cadherin水平显著降低;同浓度DDP(除0μmol/L外)处理后,与对照组相比,BC、pLJM-GAS5 NC组AGS/DDP细胞增殖抑制率明显降低;与BC、pLJM-GAS5 NC组相比,pLJM-GAS5组AGS/DDP细胞增殖抑制率显著升高。DDP对pLJM-GAS5组AGS/DDP细胞48 h的半抑制浓度(IC_(50))为(65.38±5.04)μmol/L,明显低于BC[(120.74±4.17)μmol/L]、pLJM-GAS5 NC组[(120.24±4.29)μmol/L]。结论 上调AGS/DDP细胞中LncRNA GAS5水平,可逆转AGS/DDP细胞耐药性,可能与下调NPM1的表达有关。
2023年10期 v.36 1166-1171+1178页 [查看摘要][在线阅读][下载 924K] [下载次数：55 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：80 ] - 王研研;曹欣;林浩卿;汪辉;徐永学;刘艳丽;李金阳;刘建凯;
目的 筛选一种可复苏肺炎球菌(Streptococcus pneumoniae,Spn)菌种的无动物源性物料的固体培养基。方法 首先选取19F血清型Spn对无动物源材料的9种配方培养基进行初步筛选,再对其他23个疫苗血清型Spn进行培养测试验证。通过对传代15代的培养物进行菌种检定与荚膜多糖抗原基因序列分析,判断筛选的配方培养基对各型菌种传代稳定性的影响。用此培养基复苏的菌种按生产程序进行发酵培养,分析培养情况及荚膜多糖抗原产量及质量,确定筛选培养基的生产适用性。结果 在筛选的配方固体培养基上,各型Spn培养11～15h时活菌数量较高,15代终末代次的菌种检定、抗原基因序列与对照(羊血固体培养基培养的菌种)相比无差异。用其复苏的菌种发酵培养后,菌体生长与荚膜多糖产量略有提高,且荚膜多糖相关检定指标均符合《中国药典》三部(2020版)标准。结论 筛选的无动物源性固体培养基具有良好的适用性,可取代血液来源培养基用于Spn疫苗生产菌种复苏。
2023年10期 v.36 1172-1178页 [查看摘要][在线阅读][下载 1073K] [下载次数：146 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：71 ] - 牛银银;陈鹏;崔红米;杨潇燕;米贯勋;李三华;刘文弟;齐华;
目的 探讨不同稀释液对混合酶标抗体稳定性的影响,筛选出一种适用于混合酶标抗体的稀释液,可同时保护辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)偶联二抗和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)偶联二抗鸡尾酒混合物的稳定性。方法 以Tris-HCl缓冲盐溶液为基础溶液,设置4种不同的稀释液配方(A、B、C、D),每种配方包含不同类型的稳定剂,如蛋白、金属离子、表面活性剂、抑菌剂等,采用不同的稀释液配置混合酶标抗体,在冷藏(2～8℃)和37℃条件下存储,通过ELISA、酶活测定及免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)染色法检测其稳定性。结果 D液配方[Tris(50 mmol/L)+牛血清白蛋白(1.5%,g/100mL)+Tween-20(0.3%)+Proclin-950(0.1%,g/100 mL)+氯化钠(150 mmol/L)+L-Ascorbic Acid(1 mmol/L)+L-methionine(5 mmol/L)+L-histidine(5 mmol/L)+酪蛋白酸钠(1%,g/100 mL)+氯化锌(0.1 mmol/L)+海藻糖(8%,g/100 mL)]保存试剂的稳定性最好,在37℃条件下保存10周,HRP偶联二抗和AP偶联二抗的工作液效价最高,HRP和AP的活性剩余比率分别为93.46%和96.07%,IHC结果 无明显差异。结论 该配方稀释液可用于混合酶标抗体工作液的配置。
2023年10期 v.36 1179-1184页 [查看摘要][在线阅读][下载 1237K] [下载次数：168 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：75 ] - 刘莉;邓向亮;韩亮;叶昊;
目的 探讨抗生素(antibiotic,ATB)联合抗程序性细胞死亡蛋白1 (programmed cell death protein 1,PD1)抗体免疫治疗对小鼠肝癌疗效的影响。方法 建立雄性BALB/cH_(22)荷瘤小鼠模型,于建模后腹腔注射抗PD1抗体(250μg/只)免疫治疗,同时给予小鼠灌胃头孢曲松钠(100 mg/kg)+盐酸林可霉素(200 mg/kg),设灌胃生理盐水的正常对照组(0.2 mL/只),每组8只。通过小鼠肿瘤体积、肿瘤组织的苏木素-伊红(HE)染色和脾指数评估ATB与抗PD1抗体联合治疗的抗肿瘤效果;ELISA法检测小鼠血清中IL-2、IL-10、IFNγ细胞因子分泌水平;流式细胞术分析小鼠淋巴细胞中CD3~+和CD8~+T细胞比例;免疫组化(immunohistochemistry,IHC)法检测小鼠肿瘤组织中CD3和CD8表达水平。结果 ATB与抗PD1抗体联合治疗对肿瘤生长有显著抑制作用,上调了T淋巴细胞中CD3~+和CD8~+T细胞比例及IL-2、IL-10、IFNγ细胞因子分泌水平;通过上调肿瘤组织中CD3和CD8表达水平来调节T细胞免疫功能,以持续激活免疫系统,抑制肿瘤。结论 窄谱ATB可能通过改善免疫功能以促进抗体免疫治疗对肿瘤的抑制效果。
2023年10期 v.36 1185-1191+1197页 [查看摘要][在线阅读][下载 1111K] [下载次数：406 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：63 ]
- 孙召朋;沈明月;唐昭娜;袁灿;王欣;彭秀娥;王翠;惠希武;刘伯宁;姚兵;
目的 通过杂交瘤技术获得抗磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(glypican 3,GPC3)单克隆抗体,并制备抗体偶联药物(antibody-drug conjugate,ADC),评价ADC的抗肿瘤活性。方法 采用免疫雄性BALB/c小鼠的方式获得高亲和力抗GPC3单克隆抗体,采用ELISA、流式细胞术检测抗体对抗原的亲和力及在肿瘤细胞的内吞率;并通过定点偶联技术获得DAR(drug-to-antibody ratio)为2的ADC药物,细胞杀伤试验检测其对肝癌细胞HepG2和Hep3b的增殖抑制效果。结果 抗体16C8-8E6在蛋白水平有很高的亲和力,EC_(50)为2.51 ng/mL,细胞水平(高表达GPC3的稳转株4E1、Hep3b、HepG2)亲和力明显高于原研抗体GC33(t分别为14.9、13.0和12.9,P均<0.05),在高表达GPC3的稳转株4E1的荧光强度为20 542±107;内吞率优于原研抗体GC33,48 h内吞率达73.9%。16C8-8E6-ADC对肝癌细胞HepG2和Hep3b有一定的抑制增殖活性。结论 成功获得靶向GPC3的单克隆抗体,为靶向GPC3的免疫疗法研究奠定了基础。
2023年10期 v.36 1192-1197页 [查看摘要][在线阅读][下载 894K] [下载次数：141 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：76 ] - 俞小娟;于传飞;刘春雨;武刚;李萌;王文波;郭璐韵;付志浩;赵雪羽;王兰;
目的 建立针对抗程序性死亡受体1 (programmed cell death protein 1,PD-1)/细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4,CTLA-4)双特异性抗体的关键质量属性质控方法 。方法 采用报告基因法测定PD-1靶点的细胞生物学活性,流式细胞荧光分选法测定CTLA-4靶点的竞争结合活性;还原/非还原十二烷基硫酸钠毛细管电泳(capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate,CE-SDS)和分子排阻高效液相色谱(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)法进行抗体分子大小变异体的控制;成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary isoelectric focusing electrophoresis,iCIEF)法测定电荷异质性;运用肽图对抗PD-1/CTLA-4双特异性抗体进行鉴别;超高效液相色谱法分析糖型。结果 PD-1靶点的细胞生物学活性半数最大效应浓度(concentration for 50%of maximal effect,EC_(50))为(6.91±0.78) nmol/L,相对参比品的生物学效价为(103.50±13.08)%,RSD为12.64%;CTLA-4靶点活性的EC_(50)为(0.35±0.28) nmol/L,相对参比品的生物学效价为(99.30±9.15)%,RSD为8.32%;还原CE-SDS的轻链与重链峰面积之和百分比为(98.86±0.02)%。非还原CE-SDS主峰峰面积百分比为(93.07±0.13)%,片段百分比为(4.44±0.13)%,聚体百分比为(2.49±0.15)%。SEC-HPLC单体的峰面积百分比为(97.20±0.01)%,聚体峰面积百分比为(2.68±0.01)%。iCIEF分析的A组峰面积百分比为(38.43±0.54)%,B组峰面积百分比为(43.26±0.32)%,C组峰面积百分比为(11.31±0.14)%,D组峰面积百分比为(7.00±0.17)%。肽图检测抗PD-1/CTLA-4抗体具有相应的特征图谱,能够用于鉴别。占比最高的糖型为G0F,含量为(41.06±0.11)%;含唾液酸的糖型共3种,分别为G2F+G1F-NANA、G2F-NANA和G2F-2NANA,含量分别为(12.44±0.12)%、(12.00±0.05)%和(5.37±0.05)%,含唾液酸糖型的总体含量为(29.80±0.20)%。结论 针对抗PD-1/CTLA-4双特异性抗体的关键质量属性建立了相应的质量控制方法 ,可确保其安全、有效和质量可控,为该类单抗产品的质量控制方法 和策略提供了参考。
2023年10期 v.36 1198-1205页 [查看摘要][在线阅读][下载 1039K] [下载次数：373 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：109 ] - 师江龙;孙文泽;乐鑫;潘勇兵;
目的 制备针对严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)IgA单克隆抗体,对其表达条件进行优化以提高表达量,并初步探讨IgA抗体在抗SARS-CoV-2中的效应。方法 将编码IgA1-F61抗体序列的质粒与聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)转染试剂混合后转染EXPi293F~(TM)细胞,瞬时表达抗体蛋白;通过优化重链(heavy chain,Hc)、轻链(light chain,Lc)、J链(joining chain,Jc)比例、质粒与PEI比例、转染后收获时间确定单体IgA1(monomeric IgA1,mIgA1)-F61及二聚体IgA1(dimeric IgA1,dIgA1)-F61在EXPi293F~(TM)细胞中的最佳培养条件以及最佳表达量。将转染后上清经亲和层析纯化后,BCA法测定浓度,SDS-PAGE及体积排阻高效液相色谱(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)法分析抗体表达完整性及纯度,假病毒中和试验检测抗体中和活性。结果 当He与Lc比例为1:2、质粒与PEI比例为1:3、转染后5d收获上清时,mIgA1-F61最高表达量为123.45μg/mL,纯化后抗体纯度达95%以上;Hc:Lc:Jc为1:2:1时,可获得最大纯度的dIgA1-F61,达90%以上。针对OmicronBA.4/5的假病毒中和试验结果 显示,dIgA1-F61呈现优于IgG-F61的中和活性,其最大半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))降低了4倍左右。结论 成功表达了重组抗SARS-CoV-2单克隆抗体mIgA1-F61和dIgA1-F61,纯度较高,且dIgA1在体外展现出优于IgG的中和活性。
2023年10期 v.36 1206-1212页 [查看摘要][在线阅读][下载 1125K] [下载次数：125 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：76 ]
- 董莉;姜婷婷;周宇荀;李凯;肖君华;
目的 建立端粒酶活性的多重荧光定量PCR(Taqman探针)检测方法 ,并进行验证。方法 针对端粒酶催化亚基(telomerase reverse transcriptase,TERT)的CDS序列设计特异性逆转录引物、2对定量引物及探针。优化反应体系中的逆转录引物(特异性逆转录引物和随机引物)及定量引物(2对定量引物探针单独及混合使用),与内参基因GAPDH引物和探针在单管中进行多重荧光定量PCR反应。用293T及MRC-5细胞分别制备端粒酶阳性标准品及阴性标准品,并验证方法 的稳定性及精密性。采用建立的方法 检测19份正常间充质细胞样本和32份乳腺癌细胞样本的端粒酶活性。结果 最佳反应体系为:以特异性逆转录引物合成的cDNA为模板,将TERT基因2对定量引物和探针混合后与内参基因GAPDH引物和探针在单管中进行多重荧光定量PCR反应。优化后大幅提高了体系的灵敏性,TERT荧光信号量(2Rn)增强了3倍。阳性标准品TERT基因扩增曲线正常,且与GAPDH基因之间的2Ct保持稳定;阴性标准品GAPDH基因扩增曲线正常,无TERT基因扩增曲线。反复冻融;3及5次阳性标准品的TERT与GAPDH基因之间的ΔCt与未冻融过的阳性标准品比较,差异较小;组内和组间精密性CV均<1%。19份正常间充质细胞样本端粒酶活性均为阴性,32份乳腺癌细胞样本端粒酶活性均为阳性,两者TERT基因的Ct值差异有统计学意义(t=4.236,P <0.001)。结论 建立的端粒酶活性多重荧光定量PCR(Taqman探针)检测方法 具有良好的稳定性及精密性,有望应用于肿瘤早期诊断和基因治疗。
2023年10期 v.36 1218-1223页 [查看摘要][在线阅读][下载 972K] [下载次数：287 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：72 ] - 官月婵;马鑫宇;肖红剑;王东宝;王学付;李娇春;谭银珍;李智华;寸韡;
目的 优化重组破伤风毒素重链片段C (recombinant tetanus toxin heavy chain fragment C,rTTHc)蛋白的原核表达条件。方法 将密码子优化后的rTTHc基因片段分别插入原核表达载体pET30a、低温表达载体pColdⅡ和高温诱导表达载体pBV220中,构建重组表达质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以表达量及可溶性为检测指标,比较不同温度条件下rTTHC蛋白的表达情况。结果 42℃诱导4 h pBV220-rTTHc表达量较低,蛋白可溶性较差;37℃诱导4h pET30a-rTTHc表达量与15℃诱导8 h pCold-rTTHc表达量相当,但可溶性表达略低于pCold-rTTHc。28℃诱导4 h,pET30a-rTTHc可获得高表达量和高可溶性表达,且表达周期短。结论 pET30a-rTTHc在28℃经2mg/mL IPTG诱导可高效表达rTTHc蛋白。
2023年10期 v.36 1224-1229页 [查看摘要][在线阅读][下载 902K] [下载次数：266 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：86 ] - 徐康维;朱文慧;宋彦丽;英志芳;王剑锋;权娅茹;李长贵;
目的 建立牛多抗对兔多抗夹心ELISA方法 检测Sabin株脊灰病毒灭活疫苗(Sabin strain inactivated poliovirus Vaccine,sIPV)D抗原含量,并对建立的方法 进行验证。方法 分别采用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型sIPV疫苗原液作为抗原制备兔多抗,并通过间接ELISA法检测其效价及特异性。以牛多抗为包被抗体、兔多抗为显示抗体建立检测D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法 ,并对方法 的准确度、精密度及D抗原专属性进行验证。用建立的方法 检测国内5家企业sIPV疫苗样品。结果 制备获得型别特异性好、效价高的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型兔多抗,并成功建立了双抗体夹心ELISA方法 。采用四参数拟合,3型别标准曲线均具有良好的线性关系,R~2均>0.99。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型各试验加标回收率均为80%～120%,各浓度平均回收率分别为98.11%、97.41%、98.66%;重复性与中间精密度CV均<10%;能够对D/C抗原进行区分。建立的方法 对5家企业生产的sIPV疫苗均能够进行D抗原定量检测。结论 成功建立了检测sIPV疫苗D抗原含量的双抗体夹心ELISA方法 ,该方法 准确度、精密度良好,具有一定的D抗原特异性,能够对不同厂家生产的疫苗进行检测。
2023年10期 v.36 1230-1234+1241页 [查看摘要][在线阅读][下载 870K] [下载次数：261 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：101 ] - 马陌;孙瑞欣;王江林;刘冰莹;刘景会;
目的 优化重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)-Fc免疫融合蛋白多聚体含量尺寸排阻高效液相色谱(size exclusion chromatography-high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)检测方法 ,并对优化的方法 进行验证。方法 利用SEC-HPLC法对rhGH-Fc免疫融合蛋白中多聚体含量进行检测,优化检测条件(盐浓度、流动相pH、流速、柱温及色谱柱型号),观察目的 蛋白与聚合体分离的效果。对方法 的系统适应性、专属性、线性与范围、精密性、准确性及定量限进行验证。结果 优化后的方法 为采用TSK-gel G2000SW_(xl)色谱柱(5μm,7.8 mm×300 mm)进行测定,流动相50 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 6.80),检测波长280 nm,进样量100μL,流速0.6 mL/min,柱温45℃。rhGH-Fc免疫融合蛋白与聚合物分离度、理论塔板数、拖尾因子均能满足要求;rhGH-Fc免疫融合蛋白样品与对照品出峰时间一致,GH国家标准品与对照品出峰时间不同,蛋白缓冲液不出峰;rhGH-Fc免疫融合蛋白浓度在0.307～1.842 mg/mL范围内,其峰面积与上样量呈良好的线性关系(R~2=0.999 4);重复性验证峰面积和纯度的RSD分别为0.7%和0.1%;中间精密性验证的RSD为0.8%;准确性验证的平均回收率为99.1%,RSD为1.9%;定量限为6μg/mL。结论 采用优化后的SEC-HPLC法检测rhGH-Fc免疫融合蛋白多聚体含量,准确性有所提高,柱效与分离度符合《中国药典》四部(2020版)的相关规定,可用于对样品中高分子含量的检测。
2023年10期 v.36 1235-1241页 [查看摘要][在线阅读][下载 887K] [下载次数：155 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：77 ] - 温嘉纳;李婧妍;姬光;廖宏玮;李燕;段维国;何春艳;孙明波;顾琴;
目的 建立测定白喉产毒培养基中微量铁离子的磺基水杨酸分光光度法,并进行验证及初步应用。方法 全光谱扫描铁-磺基水杨酸络合物最大吸光度;以铁磺基水杨酸络合物吸光度与铁离子含量进行线性回归,建立培养基中铁离子检测方法 ,并对方法 进行稳定性、准确性和精密性验证;考察Ca~(2+)、Mg~(2+)、K~+、Na~+以及显色反应物对方法 的影响;采用磺基水杨酸分光光度法测定自制及市售白喉产毒培养基中微量铁离子;分别采用磺基水杨酸分光度法及常用方法 亚铁嗪比色法、邻菲啰啉分光光度法检测两种培养基(牛肉胰酶消化液、5%多聚蛋白胨)中铁含量,比较3种方法 的检测结果 。结果 铁-磺基水杨酸络合物在波长425 nm处有最大吸光度;铁离子浓度在1～0.05μg/mL范围内与吸光度存在良好的线性关系,检测限为0.05μg/mL,标准曲线方程为:Y=0.027 9X+0.046 1,R~2>0.99;每间隔5 min测定1次A425值,各浓度标准品A_(425)值的变异系数(CV)均小于5%;低(0.05μg/mL)、中(0.5μg/mL)、高浓度(1μg/mL)Fe~(3+)标准品溶液连续测定3次,每个浓度平行测定9组的CV均<5%,回收率均>95%;Ca~(2+)、Mg~(2+)、K~+、Na~+、15μL磺基水杨酸(20%)和50μL氢氧化氨(1:1)不对检测方法 构成干扰;产毒培养基测定结果 与白喉细菌产毒结果 一致;3种检测方法 结果 一致。结论 建立的磺基水杨酸分光光度法能够准确、有效地测定白喉产毒培养基中微量铁离子含量。
2023年10期 v.36 1242-1247页 [查看摘要][在线阅读][下载 871K] [下载次数：92 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：65 ]
- 李嫚琪;魏丽萍;李英奇;陶巧玉;许瀚林;何伟伟;汤纳平;汪溪洁;王庆利;常艳;
细胞外囊泡(extracellular vesicles,EV)这一概念在2011年由国际细胞外囊泡协会(International Society for Extracellular Vesicles,ISEV)提出,其可作为治疗药物以及药物的递送载体广泛应用于疾病治疗的各个领域。基于EV的疗法可能成为一种除传统药物治疗和细胞治疗之外的疾病治疗新模式——EV无细胞疗法。作为载体,相比于病毒载体和合成非病毒载体,EV具有独特的优势,潜力巨大。但EV由于其特有的生物学性质,在临床转化中具有一定困难。且该领域相对较新,尚无专门针对基于EV疗法的相关政策和法规出台。本文通过ClinicalTrials.gov平台采集信息,总结基于EV疗法的研究进展,针对现有的监管体系提出建议,并对EV非临床研究的一般原则、药学研究、药效学和药代动力学研究及安全性评价等非临床评价策略进行探讨,为制定基于EV疗法的非临床评价研究方案提供参考。
2023年10期 v.36 1248-1255+1262页 [查看摘要][在线阅读][下载 895K] [下载次数：228 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：96 ] - 安霖;张宏伟;
近年来,多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的治疗取得了较大进展。尽管这种恶性肿瘤的预后有所改善,但经常以复发告终,因此亟需开发新的治疗方法 。目前已经评估了针对B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)、白细胞分化抗原19(cluster of differentiation 19,CD19)、白细胞分化抗原38(cluster of differentiation 38,CD38)和kappa轻链等多个靶点的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)-T细胞,并在临床试验中取得了显著成果。但即使采用CAR-T细胞免疫疗法进行MM治疗,大多数患者仍会复发,这是该疗法的局限性。本文对CAR-T细胞免疫疗法在MM中的研究进展、治疗MM的局限性及其优化作一综述。
2023年10期 v.36 1256-1262页 [查看摘要][在线阅读][下载 878K] [下载次数：190 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：69 ] - 王二龙;张文婷;宋嘉宁;王娟;
Septin是一类存在于除高等植物外的真核生物中高度保守的GTP结合蛋白。不同亚型的Septin可通过异源多聚体的形式形成丝状或环状等更高级有序的结构发挥相应功能,可调控酵母出芽、细胞分裂等生理过程,并参与宿主细胞的防御反应。Septin的异常表达或突变与肿瘤和神经系统疾病的发生、发展密切相关。本文就Septin蛋白家族成员的生理功能、Septin对肿瘤和神经系统疾病发生发展的影响以及Septin在宿主免疫应答过程中的作用等作一综述。
2023年10期 v.36 1263-1270页 [查看摘要][在线阅读][下载 1031K] [下载次数：106 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：65 ] - 郝晓甜;李克坚;周诚;毛群颖;
手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)是一种严重影响婴幼儿健康的传染病,为全球范围内特别是亚太地区的重大公共卫生问题之一。HFMD可由多种肠道病毒引起,其中以肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus A16,CVA16)最为常见。近年,随着柯萨奇病毒A组6型(Coxsackievirus A6,CVA6)感染引发HFMD比例大幅上升,CVA6逐渐成为造成全球多个国家和地区HFMD暴发的主要病原体。CVA6不仅易造成儿童感染,也易侵袭免疫功能正常的成年人,严重威胁人类健康。本文就CVA6的病原学、流行病学、临床症状、实验室诊断及其疫苗相关研究进展作一综述。
2023年10期 v.36 1271-1275+1280页 [查看摘要][在线阅读][下载 863K] [下载次数：367 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：72 ] - 崔靖;王靖宇;韦薇;
<正>近年来嵌合抗原受体T细胞（chimericantigen receptor T-cell,CAR-T）产品在肿瘤治疗领域呈现较突出的优势，且已经成为细胞和基因治疗领域商业化进展较为快速的一类产品。截至2023年7月，全球共有9个CAR-T产品获批上市，其中国外批准上市的6个CAR-T产品包括：
2023年10期 v.36 1276-1280页 [查看摘要][在线阅读][下载 810K] [下载次数：215 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：72 ] 下载本期数据