- 陈美丽;贾重来;赵雪;陈宇;朱小宇;张弓;张劲峰;柯伟;
目的研究H7N9型流感疫苗生产用毒种NIBRG-267的传代稳定性,为制定毒种传代限定次数提供依据。方法将VE2代原始毒种NIBRG-267接种鸡胚尿囊腔,并连续传10代(VE3~VE12),参照《中国药典》三部(2010版)相关要求,对各代次毒种进行鉴别试验、支原体、无菌检查及血凝滴度、病毒滴度、外源因子检测,提取VE3、VE4、VE5、VE12代病毒总RNA,采用RT-PCR法扩增血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因,并进行测序,与Gen Bank中公布的A/Shanghai/02/2013(H7N9)基因序列进行比对分析。结果 VE2代病毒连续传10代至VE12代,血凝滴度均不低于1∶480,病毒滴度均不低于8.2 Lg EID50/ml,鉴别试验、支原体、无菌检查及外源因子检测结果均符合要求。VE3、VE4、VE5、VE12代病毒的HA和NA基因核苷酸和氨基酸序列均一致,与A/Shanghai/02/2013(H7N9)的HA(KF021597.1)、NA(KF021599.1)基因序列一致。结论 H7N9型流感疫苗生产用毒种NIBRG-267连续传10代,生物学和遗传稳定性均良好,为制定毒种传代限定次数提供了数据支持。
2016年07期 v.29 673-677页 [查看摘要][在线阅读][下载 429K] [下载次数：167 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：979 ] - 张改梅;殷建齐;尹珊珊;朱芮波;甘建辉;肖坚;胡光楠;刘建凯;
目的优化五价口服轮状病毒活疫苗的稳定剂配方。方法采用正交试验,以疫苗37℃放置1周的病毒滴度为检测指标,分别对A组(含蔗糖、琥珀酸钠、琥珀酸和谷氨酸钠)、B组(含蔗糖、柠檬酸钠、柠檬酸和山梨醇)、C组(含甘露醇、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠和蔗糖)稳定剂配方进行优化。结果 A组稳定剂配方最佳组合为40%蔗糖、0.2 mol/L琥珀酸钠、0.01 mol/L琥珀酸、0.05 mol/L谷氨酸钠;B组稳定剂配方最佳组合为40%蔗糖、0.1 mol/L柠檬酸钠、0.005 mol/L柠檬酸、1%山梨醇;C组稳定剂配方最佳组合为40%蔗糖、0.1 mol/L磷酸氢二钠、0.005 mol/L磷酸二氢钠、0.5%甘露醇。结论 3种稳定剂的最佳配方均对五价口服轮状病毒活疫苗具有较好的稳定作用。
2016年07期 v.29 678-680+685页 [查看摘要][在线阅读][下载 137K] [下载次数：316 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：936 ]
- 赵玉娇;蔡路奎;王晓丹;席珏敏;陈俊英;潘玥;邱丽娟;姜黎明;孙强明;
目的评价Cp G ODN佐剂序列IMB-AC5联合乙型肝炎疫苗的免疫原性,以评估IMB-AC5佐剂的应用前景。方法利用市售的单铝佐剂乙型肝炎疫苗,根据相同配比加入3种Cp G ODN(IMB-AC5及Coley 7909和Dynavax 1018),作为实验组(V-AC5、V-7909和V-1018),并以乙型肝炎疫苗为对照组,分别免疫BALB/c小鼠,于免疫后2、4、6、8周,经尾静脉采血,第10周处死小鼠采集全血,分离血清,采用乙肝表面抗体试剂盒检测anti-HBs抗体水平,ELISA法检测Ig G1/2a亚型抗体比例;ELISPOT法检测小鼠脾细胞IFNγ表达水平。结果免疫后0~4周内,各组小鼠血清抗体水平均无明显变化,第6周开始呈明显上升趋势,至第8周后趋于平缓;各实验组抗体水平均明显高于对照组(P<0.05),V-AC5显示出与V-7909同样良好的体液免疫效果,略优于V-1018。免疫后各实验组小鼠血清中Ig G2a/Ig G1比例明显高于对照组。各实验组小鼠脾细胞斑点数明显高于对照组(P<0.05);V-AC5斑点数介于其他两个实验组之间。结论 IMB-AC5佐剂能显著活化B细胞产生抗体并具有刺激细胞免疫的效果,可增强疫苗的免疫原性。
2016年07期 v.29 681-685页 [查看摘要][在线阅读][下载 219K] [下载次数：142 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1112 ] - 郑光来;卢晓冉;张静远;陈腾;王东方;严妍;张守峰;扈荣良;
目的在毕赤酵母中分泌表达猪圆环病毒Ⅱ型(porcine circovirus 2,PCV2)Cap蛋白。方法将PCV2-Cap蛋白基因(Gen Bank登录号:KC620508.1)按毕赤酵母偏好密码子优化后,插入毕赤酵母分泌型表达载体p PICZαA中,重组质粒p PICZαA-Cap经SacⅠ线性化,通过电击转化整合至毕赤酵母GS115菌株的基因组中,构建p PICZαA-CapGS115重组酵母菌。经甲醇诱导表达重组Cap蛋白,通过SDS-PAGE、Western blot和间接ELISA法进行鉴定。结果重组表达质粒p PICZαA-Cap经双酶切和测序证明构建正确;重组酵母菌p PICZαA-Cap-GS115经菌落PCR鉴定,可扩增出1 001 bp的目的基因片段;表达的重组Cap蛋白相对分子质量约49 000,可与猪圆环2型阳性血清和小鼠抗His单克隆抗体发生特异性反应。结论成功利用毕赤酵母表达系统分泌表达了PCV2 Cap蛋白,表达的重组蛋白具有良好的抗原性,为PCV2亚单位疫苗和ELISA诊断试剂盒的研制奠定了基础。
2016年07期 v.29 686-689+695页 [查看摘要][在线阅读][下载 256K] [下载次数：424 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1152 ] - 罗春海;张雷;刘健莹;刘瑶;邹晓;郑程远;付世新;
目的探讨PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响。方法构建PTEN过表达的重组腺病毒载体,病毒扩增后,感染犊牛原代肝细胞,并设空白对照组(加入PBS)和阴性对照组(感染阴性对照腺病毒AD-GFP),感染48 h后,荧光定量PCR检测细胞中PTEN、脂肪酸氧化代谢转运主要基因CPTⅠ、CPTⅡm RNA的表达水平,Western blot检测相应蛋白表达水平。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确。过表达PTEN基因后,可升高CPTⅠ和CPTⅡ基因m RNA和蛋白的表达量(P<0.01)。结论 PTEN通过调节脂肪酸氧化酶转录和翻译水平,对脂肪酸在肝细胞内的氧化代谢过程进行调节,其有望作为临床有效的生物调控药物,用于治疗奶牛脂肪肝。
2016年07期 v.29 690-695页 [查看摘要][在线阅读][下载 422K] [下载次数：114 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：816 ] - 冉旭华;曹思;刘阳阳;张玲玲;张峣;倪宏波;闻晓波;
目的原核表达牛轮状病毒(rotavirus,RV)VP6蛋白,并制备其多克隆抗体。方法根据Gen Bank中登录的牛RV UK株VP6基因序列(X53667.1)设计一对特异性引物,RT-PCR扩增牛RV UK株VP6全长编码区片段,克隆至载体p ET-28a,构建重组表达质粒p ET-28a-Bo-RV-VP6,转染至E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。将重组蛋白与弗氏佐剂混合后免疫豚鼠,共免疫3次,每次间隔2周,末次免疫后2周,经心脏采血,分离血清,制备VP6多克隆抗体,Western blot法检测其与牛RV的反应原性。结果经双酶切和测序鉴定,重组表达质粒p ET-28a-Bo-RV-VP6构建正确。重组蛋白以包涵体的形式表达,表达产物分别为43 000、34 000、27 000和15 000 4种不同相对分子质量的重组蛋白,纯化后纯度可达95%以上,可与牛RV阳性血清发生特异性反应。制备的VP6蛋白多克隆抗体效价>1∶7 000,且可识别RV天然VP6蛋白。结论原核表达了牛RV VP6蛋白,并制备了抗VP6多克隆抗体,为后续RV疫苗效力评价及RV侵入机理等方面的研究奠定了基础。
2016年07期 v.29 696-700页 [查看摘要][在线阅读][下载 229K] [下载次数：307 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：889 ] - 周向东;李雪;马彦;张萍萍;张思;刘元林;王洋;童英;张毅;
目的探讨肿瘤转移抑制基因1(metastasis suppressor 1,MTSS1)及Gli1基因在子宫内膜腺癌细胞系Ishikawa和HEC-1A中的m RNA的转录及蛋白表达水平。方法体外培养子宫内膜高分化腺癌细胞系Ishikawa和中分化腺癌细胞系HEC-1A细胞,采用RT-PCR和Western blot法分别检测两株癌细胞系中MTSS1和Gli1基因m RNA的转录及蛋白的表达水平。结果子宫内膜高分化腺癌细胞系Ishikawa中MTSS1基因m RNA的转录及蛋白的表达水平显著高于中分化细胞系HEC-1A(P<0.05),Ishikawa细胞系中Gli1基因m RNA转录及蛋白表达水平显著低于HEC-1A细胞系(P<0.05)。结论 MTSS1可能作为转移抑制基因,通过调控Sonic hedgehog(Shh)信号通路参与子宫内膜腺癌的发生发展,为进一步研究子宫内膜腺癌的发生发展机制奠定了基础。
2016年07期 v.29 701-703+710页 [查看摘要][在线阅读][下载 191K] [下载次数：88 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：804 ] - 王建发;薛琳琳;吴建民;吴殿君;翁春玲;孙东波;张旭;武瑞;
目的获得具有生长激素(growth hormone,GH)和催乳素(prolactin,PRL)分泌功能的奶牛腺垂体细胞(dairy cow anterior pituitary cells,DCAPCs),并对其进行鉴定和特征分析。方法采用免疫组织化学方法对奶牛腺垂体中GH和PRL分泌细胞进行定位,利用酶消化法对其所在部位进行消化,获得的细胞经分离培养后,用形态学方法和免疫组织化学方法进行鉴定,并分析其传代性能;采用实时荧光定量PCR及ELISA方法对其GH和PRL合成和分泌特征进行分析。结果 GH分泌细胞主要位于腺垂体侧翼区下缘,而PRL分泌细胞主要位于腺垂体侧翼区上缘。获得的DCAPCs接种培养2 d后,可见形状规则的铺路石样上皮细胞,经免疫组织化学法鉴定,可分泌GH和PRL,经多次传代后仍可表达GH和PRL,但表达水平随代次增加而降低。结论成功建立了DCAPCs分离培养方法,可用于体外研究奶牛GH和PRL合成及分泌的调控机制。
2016年07期 v.29 704-710页 [查看摘要][在线阅读][下载 488K] [下载次数：176 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：975 ]
- 曹凤瑞;付思美;田鑫;程涛;陈超;吕淑梅;李大强;林琳;周剑惠;黄彪;
目的评价吉林省2006和2014年调查人群乙型肝炎病毒感染标志物的流行情况及乙型肝炎疫苗纳入计划免疫后的免疫效果,为制定全省乙型肝炎防治措施提供科学依据。方法采用多阶段随机抽样方法,对吉林省4个地级市中5个县(市、区),于2006年抽取1~59岁人群2 239人,2014年抽取1~29岁人群650人,进行乙型肝炎流行病学调查,并采集血液样本,ELISA法检测乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBs Ag)、乙型肝炎病毒表面抗体(hepatitis B surface antibody,HBs Ab)、乙型肝炎病毒核心抗体(hepatitis core antibody,HBc Ab);用EPIData3.1建立数据库,SPSS 13.0软件进行数据统计学分析。结果 2006和2014年调查人群各年龄组接种率及全程接种率差异有统计学意义(P<0.016 7)。2006年15~59岁组人群HBs Ag携带率和乙型肝炎病毒感染率均高于其他两组(P<0.016 7);HBs Ab阳性率随年龄组升高而降低。2014年各年龄组人群HBs Ag、HBs Ab携带率及乙型肝炎病毒感染率差异无统计学意义(P>0.05)。2006年调查人群HBs Ag携带率及乙型肝炎病毒感染率均低于1992年而高于2014年,HBs Ab阳性率高于1992年而低于2014年,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论接种乙型肝炎疫苗可有效控制乙型肝炎病毒的感染;免费接种可提高乙型肝炎疫苗接种率,降低HBs Ag携带率及HBV感染率,在青少年、成年及老年人中进行有效接种,可降低易感人群的感染风险。
2016年07期 v.29 725-728+732页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K] [下载次数：224 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：753 ] - 陈海平;翟力军;马燕丽;陈丹丹;黄清霄;张岷;徐斌;吕敏;吴疆;刘小琴;
目的分析流感病毒裂解疫苗上市后,在北京市人群中的接种率、安全性以及相关的影响因素。方法通过北京市免疫规划信息管理系统收集研究疫苗的受种者信息,通过中国免疫规划信息管理系统"AEFI监测管理"模块收集疑似预防接种异常反应(adverse event following immunization,AEFI)个案信息,采用线性趋势卡方检验分析疫苗接种率及相关影响因素。结果 2014年9月~2015年3月,北京地区流感病毒裂解疫苗接种率为2.01%(95%CI:2.00%,2.02%),男性接种率低于女性(P<0.05);受种者平均年龄为(70.63±9.20)岁,其中60岁以上老年人占98.6%,99.8%在9~11月份完成接种;在各年龄组老年人群中,65~74岁组接种率高于其他组,85岁以上组接种率最低(P<0.05);人均可支配收入低的地区接种率高于收入高的地区(P<0.05);接种疫苗后共计报告AEFI病例5例,无严重AEFI和群体性AEFI病例报告。结论上海生物制品研究所有限责任公司生产的流感病毒裂解疫苗具有良好的安全性,有待进一步提高老年人群和其他年龄组人群的流感疫苗接种率。
2016年07期 v.29 729-732页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K] [下载次数：246 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：1006 ] - 周凤岩;李扬;左中宝;邢辉;乔建国;
目的观察2014~2015年吉林市内抗病毒治疗失败HIV-1感染者中HIV基因型耐药情况及其亚型分布。方法收集吉林市2014~2015年HIV-1感染者中接受抗病毒治疗后HIV病毒载量≥1 000拷贝/ml的患者血浆样本,提取病毒RNA,进行POL基因区扩增及测序后,使用美国斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药位点分析,Mega 6.0软件Neighbor-joining tree方法构建系统进化树,进行亚型分布分析。结果 2014~2015年275份抗病毒治疗失败人群血浆样本全部扩增成功,共发现106份基因型耐药样本,耐药率为38.5%,其中7份对蛋白酶类药物耐药,82份对核苷类药物耐药,99份对非核苷类药物耐药,有80份同时对核苷类和非核苷类药物耐药。核苷类逆转录酶区耐药位点以M184V/IV突变为主,非核苷类逆转录酶区耐药位点以G190G/A/S和V179D/E/G突变为主,2例蛋白酶类药物主要耐药突变位点分别为A71V/T和L10I/M/V。序列亚型以CRF01_AE为主(64.7%),主要流行簇以CRF01_AE第4、第5及CRF07_BC第1簇为主。结论耐药位点的出现是影响吉林市HIV感染者抗病毒治疗效果的一个重要原因,应加强对治疗失败患者的耐药监测,及时发现耐药突变,尽早更换药物。
2016年07期 v.29 733-736页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K] [下载次数：259 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：9 ] |[阅读次数：1017 ] - 王旭雯;修仕信;蒋静凤;吕莉;史丽敏;孙凤妹;谭文文;周建刚;
目的了解无锡市成人接种麻疹风疹联合疫苗后麻疹抗体的变化趋势,加速实现消除麻疹的目标。方法随机选择两个麻疹高发地区20~29岁、30~39岁、40~49岁3组的192名无锡市常住人口,分别于接种麻疹风疹联合疫苗前及接种后1个月、1年、2年采集静脉血清,分离血清。采用ELISA试剂盒检测麻疹Ig G抗体水平,计算抗体阳性率及几何平均浓度(GMC)。结果不同年龄组相同观察时间的麻疹抗体阳性率差异无统计学意义(P>0.05),不同观察时间麻疹抗体总阳性率差异也无统计学意义(P>0.05)。相同年龄组不同观察时间麻疹抗体GMC差异有统计学意义(P<0.01),不同观察时间各年龄组麻疹抗体GMC两两比较差异有统计学意义(P<0.01),不同年龄组同一观察时间抗体GMC差异无统计学意义(P>0.05)。结论单次接种疫苗后抗体水平会迅速上升,但维持时间不超过1年,建议通过定期加强免疫来保持较高的麻疹抗体水平。
2016年07期 v.29 737-739页 [查看摘要][在线阅读][下载 110K] [下载次数：139 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：898 ]
- 李茂光;武琳琳;米健秋;毛琦琦;李亚南;杨英;李健峰;叶强;
目的建立毛细管电泳法检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中游离载体蛋白破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)含量,并对方法进行验证及初步应用。方法采用胶束电动毛细管电泳法测定TT含量,使用内径50μm未涂层熔融石英毛细管柱(有效柱长为104 cm),以40 mmol/L硼酸盐-SDS缓冲液(p H 9.30)为电泳介质,电压为30 k V,在200 nm紫外波长条件下进行检测。对方法的专属性、线性、精密度、重复性、稳定性、准确性、定量限进行验证,并用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量。结果该方法专属性、精密度、重复性、稳定性、准确性良好,TT在10~35μg/ml范围内与色谱峰相对内标峰面积比值呈良好的线性关系,r~2=0.995,游离蛋白的定量限为7μg/ml。用建立的方法检测Y群和W135群脑膜炎球菌结合物原液各3批样品中的游离蛋白TT含量均小于10μg/ml。结论建立的毛细管电泳法操作简便、准确,可用于检测Y群和W135群脑膜炎球菌多糖结合物原液中的游离蛋白含量。
2016年07期 v.29 740-743+747页 [查看摘要][在线阅读][下载 214K] [下载次数：192 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：1008 ] - 杨萍;孙琦;孙世洋;宋月爽;白鹭;姜春来;
目的应用IFNγ释放试验评价水痘减毒活疫苗的细胞免疫效果。方法利用IFNγELISA定量试剂盒检测不同灭活抗原(热灭活、紫外灭活、甲醛灭活)刺激、不同孵育时间(24、48、72 h)、不同个体(12人接种水痘减毒活疫苗前后)对IFNγ释放水平的影响。结果紫外灭活方式制备的刺激抗原及新鲜全血与刺激抗原共孵育48 h,IFNγ释放水平最高;12人接种疫苗后全血中IFNγ释放水平均有不同程度提高,接种前后几何平均值(GMT)分别为6.13和234.75 pg/ml,增长倍数和GMT值在个体间均存在较大差异。结论 IFNγ释放试验操作简便、快速,可定量,适用于水痘疫苗细胞免疫效果的评价。
2016年07期 v.29 744-747页 [查看摘要][在线阅读][下载 198K] [下载次数：190 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：873 ] - 王淑菁;付瑞;李晓波;王吉;卫礼;贺争鸣;岳秉飞;
目的建立流感疫苗主种子批毒种中外源性禽腺病毒Ⅲ型(egg drop syndrome virus,EDSV)的荧光定量PCR检测方法,并进行验证及初步应用。方法针对EDSV六邻体蛋白保守区分别设计引物和探针,建立荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的线性、特异性、精密性、灵敏度及可行性。采用新建立的荧光定量PCR法对16株流感疫苗主种子批毒种进行外源性EDSV检测。结果该方法的最佳线性范围为1×10~4~1×10~9 copies/μl,回归曲线为y=-3.385 x+39.616,R~2>0.99;与其他种属的腺病毒及流感病毒间均无交叉反应;试验内和试验间Ct值的变异系数(CV)均<2%;灵敏度为101 copies/μl;该方法检测P0代样品的最低检测限为10-6掺入体积比例,血清学方法检测P0~P3代样品的最低检测限为10~(-2)~10~(-3)掺入体积比例。该方法检测16株流感毒种中外源性EDSV的结果均为阴性,与血清学方法检测结果一致。结论成功建立了检测EDSV的荧光定量PCR法,提高了检测灵敏度和检测效率,更好地满足了流感疫苗应急检验中快检的要求。
2016年07期 v.29 748-752页 [查看摘要][在线阅读][下载 319K] [下载次数：189 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：950 ] - 刘艳玲;曹晨华;赵伟;刘晓志;段迎霞;高健;
目的建立重组人源单克隆抗体rhu Ig G-04临床研究中免疫原性检测方法。方法建立由筛选法(桥连ELISA法)和确证法(免疫清除法)组成的多重检验方法检测重组人源单克隆抗体rhu Ig G-04临床研究中的免疫原性,并对方法进行优化,利用含有人Ig G(Fc)的融合蛋白去除类风湿因子(rheumatoid factor,RF)的干扰;通过统计大量空白血清信号值及信号抑制率,确定筛选法和确证法的临界值。在筛选法中确定了归一化因子对不同批次的临界值进行归一化处理。分析检测法对血清中rhu Ig G-04的耐受性。结果筛选法中,样品最佳稀释倍数为1/10,最佳稀释液为PBS,二抗rhu Ig G-04-HRP的最适稀释度为1/10 000;在二抗中加入浓度为1 mg/ml Fc片段的融合蛋白能有效去除RF的干扰;归一化因子为0.006,批检测临界值为阴性对照品A值+归一化因子;血清中药物浓度达到1 200 ng/ml时,对筛选法结果无影响。确证法中,向样品中加入rhu Ig G-04的适宜浓度为100μg/ml,确证法临界值为49%。结论建立的免疫原性检测方法具有较高的检测灵敏度,抗药物干扰能力强,达到了抗体药物免疫原性检测方法的基本要求,为人源单抗rhu Ig G-04免疫原性的检测提供了适宜的手段。
2016年07期 v.29 753-757页 [查看摘要][在线阅读][下载 204K] [下载次数：334 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：953 ] - 邹浩勇;杨禅堂;李陶敬;彭焱;邹莉;杨邦玲;
目的验证S/D法及干热法对人凝血因子Ⅷ(FⅧ)制品中猪伪狂犬病病毒(pesdorabies virus,PRV)和猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)的灭活效果。方法以PRV和PPV为指示病毒,模拟FⅧ生产工艺中的S/D及干热病毒灭活工艺,采用96孔板微量细胞病变法检测3批FⅧ半成品的残留病毒滴度。结果批号为201203002、2012-04003、201204004 3批FⅧ半成品经(25±1)℃S/D灭活处理15 min后,PRV滴度分别下降≥6.5、≥6.8、≥6.8 lg TCID50/0.1 ml;经(100±2)℃干热灭活30 min后,PPV滴度分别下降4.00、3.92、3.94 lg TCID50/0.1 ml。结论 S/D法及干热法分别对FⅧ制品中PRV和PPV具有良好的灭活效果,本实验为凝血因子类制品的病毒灭活验证工艺的研究奠定了基础。
2016年07期 v.29 758-760+764页 [查看摘要][在线阅读][下载 156K] [下载次数：276 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1037 ] - 吴婷;李南方;玛依拉;李瑜;周玲;张德莲;洪静;
目的比较溶液沉淀法、离心柱法和磁珠法试剂盒提取血液基因组DNA的效果。方法采集高血压患者的血液样本90份,随机分为3组,分别采用溶液沉淀法、离心柱法和磁珠法试剂盒提取血液样本基因组DNA。通过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳检测及PCR扩增法对血液样本基因组DNA的提取效果进行比较。结果溶液沉淀法提取的DNA浓度显著高于离心柱法和磁珠法(P<0.05),离心柱法与磁珠法提取的DNA浓度差异无统计学意义(P>0.05),3种方法提取血液样本基因组DNA的A_(260)/A_(280)值及A_(260)/A_(230)值的差异均无统计学意义(P>0.05);3种方法提取的血液样本基因组DNA的大小基本相同,离心柱法提取的DNA点样孔处较干净,电泳条带单一,无拖尾;3种方法提取血液样本基因组DNA的PCR产物均可见单一且明亮的目的条带。结论 3种类型提取试剂盒各有优缺点,使用时应根据实际情况进行选择。
2016年07期 v.29 761-764页 [查看摘要][在线阅读][下载 190K] [下载次数：726 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：850 ]
- 钱锋;徐沪济;
鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要成分,通过聚合鞭毛蛋白单体形成鞭毛的丝状体。鞭毛蛋白的N-末端和C-末端区域相互靠拢形成功能区域,该区域处于鞭毛丝状体的内部;中间区域是序列变异区,暴露于鞭毛丝状体表面。沙门菌鞭毛蛋白具有特殊的抗原性,称为H抗原,是沙门菌分型的依据之一。作为Toll样受体5(Toll-like receptors 5,TLR5)等先天性免疫系统受体的配体,沙门菌鞭毛蛋白是一种强效的蛋白型佐剂,已广泛应用于细菌、病毒和寄生虫的疫苗研制。本文就沙门菌鞭毛蛋白作为载体蛋白在偶联疫苗的应用作一综述。
2016年07期 v.29 765-769页 [查看摘要][在线阅读][下载 167K] [下载次数：261 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：1109 ] - 张志晓;郑颖;范泉水;
蛇毒金属蛋白酶(snake venom metalloproteinase,SVMP)是蛇毒中的重要成分,其生物活性主要包括出血活性、纤溶活性、激活凝血酶原、激活凝血因子X、抑制血小板聚集。本文对SVMP的二级和三级结构、分离纯化及原核与真核表达、生物活性、抑制剂和治疗药物的研究进展作一综述,以期开发出针对SVMP的蛇伤治疗药物和基于SVMP的临床应用药物。
2016年07期 v.29 770-773+777页 [查看摘要][在线阅读][下载 206K] [下载次数：776 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：1134 ] - 董慧君;鲁菲;张哲;曾宪卓;郭明辉;
肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)被认为是肿瘤形成、生长、转移以及复发的根本原因。CSCs的分离、鉴定为CSCs的研究及靶向CSCs疗法的开发奠定了基础。目前,无血清培养法已经是分离培养CSCs的常用方法。本文对无血清培养基(serum free medium,SFM)分离CSCs的研究进展作一综述。
2016年07期 v.29 774-777页 [查看摘要][在线阅读][下载 142K] [下载次数：431 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：1053 ] - 梁勤东;张光杰;
非编码RNA即一类不编码蛋白质的核苷酸分子的总称。肝癌高表达长链非编码RNA(long non-coding RNA highly up-regulated in liver cancer,lnc RNA HULC)为lnc RNA的一种,其水平与肝癌的发生、发展、治疗及预后有关。近年来研究发现,lnc RNA HULC与其他疾病也有重要的联系。基于此,本文对lnc RNA HULC的相关生物学功能及其与疾病的关系作一综述。
2016年07期 v.29 778-780页 [查看摘要][在线阅读][下载 112K] [下载次数：217 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：857 ]