- 张海峰;方习静;闭兰;
目的鉴定重组卡介苗-BE1726D(rBCG-BE1726D)特异性蛋白的表达,并评价其在小鼠体内的免疫原性。方法将冻干的菌株BCG-SSI和rBCG-BE1726D扩大培养后,超滤浓缩收集上清,超声破碎离心后收获菌体,Western blot法进行特异性蛋白检测。用rBCG-BE1726D和BCG-SSI菌株经腹股沟皮下免疫BALB/c小鼠6周后,分离小鼠脾淋巴细胞,ELISPOT及ELISA法检测脾淋巴细胞干扰素γ(interferonγ,IFNγ)的分泌水平;流式细胞术检测小鼠脾淋巴细胞CD4~+和CD8~+ T细胞的比例。结果菌株rBCG-BE1726D中存在Ag85B、ESAT-6、RV2626c蛋白;菌株BCGSSI中仅存在Ag85B蛋白。经Ag85B刺激后,BCG-SSI组和rBCG-BE1726D组产生的细胞斑点数均明显高于PBST对照组(P<0.05);经PPD刺激后,rBCG-BE1726D组产生细胞斑点数量显著高于BCG-SSI组和PBST对照组(P<0.000 1);各组间ESAT-6、Rv2626c、Rv1733c、RpfD刺激所产生的细胞斑点数差异无统计学意义(P>0.05)。经Ag85B刺激后,BCG-SSI组和rBCG-BE1726D组产生IFNγ的水平显著高于PBST对照组(P<0.05);经PPD刺激后,rBCG-BE1726D组的IFNγ分泌水平与BCG-SSI组差异无统计学意义(P>0.05);各组间ESAT-6、Rv1733c、Rv2626c、RpfD刺激产生的IFNγ分泌水平差异无统计学意义(P>0.05)。rBCG-BE1726D组CD4~+、CD8~+细胞总比例及CD4~+ T/CD8~+ T比值明显低于BCG-SSI组和PBST对照组(P<0.05),CD8~+ T细胞比例明显高于BCG-SSI组和PBST对照组(P<0.05)。结论 rBCG-BE1726D有较强的免疫原性,可明显提高BALB/c小鼠的免疫应答水平,但与BCG-SSI比较,其免疫原性无明显优势,需对疫苗的保护力进行进一步研究。
2016年02期 v.29 113-118页 [查看摘要][在线阅读][下载 356K] [下载次数：235 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 李月;邓唯唯;姚美雪;张佳佳;王冰;王恒;
目的探讨α-甘露糖肽(α-mannatide)作为佐剂对恶性疟原虫多表位蛋白疫苗M.RCAg-1免疫原性的影响。方法将小鼠随机分为4组:疫苗组(M.RCAg-1)、疫苗佐剂组(M.RCAg-1+α-mannatide)、佐剂对照组(α-mannatide)、弗氏佐剂对照组(M.RCAg-1+Freund’s),分别于第0、14、28天经背部皮下免疫小鼠,0.1 ml/只。采用ELISA法检测3次免疫后小鼠血清Ig G抗体水平、抗体亚型以及血清抗体对单表位的识别,间接免疫荧光反应(IFA)检测抗体对恶性疟原虫天然蛋白的识别,ELISPOT检测其细胞因子的分泌水平。结果 3次免疫后,疫苗佐剂组GMT明显高于疫苗组(P<0.05);疫苗佐剂组GMT与弗氏佐剂对照组持平(P>0.05)。疫苗佐剂组产生的高水平Ig G主要以Ig G1为主。疫苗佐剂组抗体对单表位和天然虫体的识别效果显著。免疫小鼠各表位和蛋白诱发分泌IL-4的特异性淋巴细胞克隆数高于分泌IFNγ的特异性淋巴细胞克隆数(P<0.05)。结论α-mannatide作为恶性疟原虫多表位蛋白疫苗M.RCAg-1的佐剂能诱导其产生高水平的体液免疫和细胞免疫应答,具有一定的抗疟原虫感染保护作用。
2016年02期 v.29 119-123页 [查看摘要][在线阅读][下载 243K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 吴根鹏;袁萍;王月红;王晓;毕慧;黄帼英;徐帆洪;朱为;
目的构建脑膜炎球菌(Neisseria meningitidis,Nm)表面蛋白fHBP重组表达质粒,并与PorA蛋白融合表达,对单抗原fHBP和融合抗原fHBP-PorA的免疫原性进行检测。方法筛选并优化fHBP和PorA基因序列,设计连接片段将PorA连接至fHBPC-端,构建重组表达质粒pET-24b-fHBP和pET-24b-fHBP-PorA,分别转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经镍柱亲和层析和凝胶过滤层析后免疫家兔,制备抗血清,采用间接ELISA、流式细胞术和微量血清杀菌力试验(serum bactericidal assay,SBA)评价抗原的免疫原性。结果经双酶切和测序鉴定,两个蛋白的重组表达质粒构建正确。重组蛋白fHBP以可溶形式表达,fHBP-PorA以包涵体形式表达,纯化后纯度均在90%以上。抗血清滴度均在1.0×10~5以上。流式细胞术检测显示,抗血清与Nm可发生特异性结合,且fHBP-Por A抗血清显示出一定的交叉反应。fHBP和fHBP-PorA抗血清对Nm29019的杀菌滴度为1∶128。结论 fHBP具有较好的抗原性和免疫原性,具备B群脑膜炎疫苗开发前景。多抗原融合策略需更多的优化考虑。
2016年02期 v.29 124-128页 [查看摘要][在线阅读][下载 271K] [下载次数：283 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 计红;张伟宏;连帅;王慧;马莉;李悦;郭景茹;郭文晋;李士泽;杨焕民;
目的探讨热休克蛋白(heat shock protein,Hsp)70过表达对过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导Buffalo大鼠肝细胞(BRL细胞)cleaved caspase 3表达的影响。方法将BRL细胞分为6组:空白对照组、Ad-CMV-Null组、Ad-CMV-Hsp70组、H_2O_2组、Ad-CMV-Null+H_2O_2组和Ad-CMV-Hsp70+H_2O_2组,Ad-CMV-Null、Ad-CMV-Hsp70、AdCMV-Null+H_2O_2、Ad-CMV-Hsp70+H_2O_2组分别加入1×10~7 PFU/ml的Ad-CMV-Null或Ad-CMV-Hsp70培养48 h后,H_2O_2、Ad-CMV-Null+H_2O_2和Ad-CMV-Hsp70+H_2O_2组分别加入150μmol/L H_2O_2处理2 h,空白对照、Ad-CMVNull和Ad-CMV-Hsp70组分别加入培养液培养。分别采用实时荧光定量PCR检测细胞中Hsp70基因mRNA的转录水平,Western blot法检测细胞中Hsp70及cleaved caspase 3蛋白的表达水平。结果与H_2O_2组相比,Ad-CMVHsp70+H_2O_2组细胞中Hsp70基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01),cleaved caspase 3蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。结论Hsp70可抑制caspase 3的激活最终保护BRL细胞,减少凋亡损伤。
2016年02期 v.29 129-133页 [查看摘要][在线阅读][下载 229K] [下载次数：224 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 宋婉莹;杨姝;贾俊婷;马玉媛;赵福广;章金刚;
目的使复苏后处于衰亡状态的UT-7/EPO细胞恢复正常生长状态,并优化其生长密度。方法通过更换不同培养基(改良的RPMI1640、DMEM和IMDM培养基)、调整血清浓度(10%、15%和20%)、改变生长因子加量(1、3、5 U/ml)及将小鼠腹腔细胞作为饲养细胞与UT-7/EPO细胞共培养,对UT-7/EPO细胞进行复壮。对恢复正常生长状态后的UT-7/EPO细胞,利用CCK-8法绘制细胞生长曲线,并根据生长曲线通过梯度密度培养确定UT-7/EPO细胞在不同培养器皿(48、24、12、6孔板及25 cm2细胞培养瓶)中的最适培养密度。将传代后第2天处于对数生长期的UT-7/EPO细胞冻存及复苏传代3次后,连续培养9 d,检测复壮后UT-7/EPO细胞的初步稳定性。将复壮后UT-7/EPO细胞分别用人源STR试剂及小鼠细胞STR位点进行鉴定。结果更换培养基、改变血清和生长因子加量均不能使衰亡的UT-7/EPO细胞的生长状态有明显改善;饲养细胞与UT-7/EPO细胞共培养可使UT-7/EPO细胞恢复正常生长状态;获得了UT-7/EPO细胞在不同培养器皿中的最适培养密度。复苏后的细胞生长状况良好,与未冻存前的生长状态及活力相当。人源STR位点检测结果显示,复壮后的UT-7/EPO细胞STR图谱均为单个或2等位基因峰,无其他人源细胞的污染;小鼠STR位点检测结果显示,复壮后的细胞未发现饲养细胞的污染。结论饲养细胞能够有效地使UT-7/EPO细胞复壮;最适的细胞生长密度能有效地使细胞维持在稳定、良好的生长状态。
2016年02期 v.29 134-139页 [查看摘要][在线阅读][下载 409K] [下载次数：402 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 庞雪;张嵘;姚宇;孙非非;李鹤;
目的分别使用不同细胞测定乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)滴度及乙型脑炎灭活疫苗效价,分析不同细胞对检测结果的影响。方法将JEV P3株接种至长满单层的MDBK、Vero、LLC-MK2、BHK-21细胞的6孔板,采用蚀斑试验测定JEV的PFU;将乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)免疫小鼠,取静脉血,分离血清,经56℃灭能30 min后,与JEV P3株混合,接种至长满单层的Vero、BHK-21、LLC-MK2细胞的6孔板,采用蚀斑减少中和试验检测乙型脑炎灭活疫苗的效价。结果 JEV在4种细胞上均可产生细胞病变(cytopathic effect,CPE),但在MDBK细胞上不形成蚀斑,病毒感染的Vero、LLC-MK2、BHK-21细胞的收获液病毒滴度分别为10.02、9.42和9.21 lg PFU/ml;3种细胞测定乙型脑炎灭活疫苗效价T值Vero>LLC-MK2>BHK-21,其中Vero细胞与BHK-21和LLC-MK2细胞比较,蚀斑减少率及对应T值差异有统计学意义(P<0.05),LLC-MK2与BHK-21细胞比较,蚀斑减少率及对应T值差异无统计学意义(P>0.05)。结论 4种细胞感染JEV后均可产生CPE,但MDBK细胞不能形成蚀斑;不同细胞测定疫苗效价,蚀斑减少率及对应T值也不同,其中Vero细胞测定T值最大,BHK-21细胞测定T值最小。
2016年02期 v.29 140-143页 [查看摘要][在线阅读][下载 204K] [下载次数：379 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：1 ] - 樊永亮;李瑞瑶;亐开兴;黄必志;张慧敏;杨章平;
目的克隆西门塔尔牛(Simmental)瘤胃木聚糖酶基因Rua11A,并进行相关序列分析。方法采用巢式PCR及单侧PCR技术从西门塔尔牛瘤胃微生物宏基因组DNA内直接克隆木聚糖酶基因Rua11A,并利用生物信息学软件对该基因序列及其编码氨基酸序列进行预测和分析。结果拼接后获得了1 278 bp的Rua11A编码区DNA序列,包括762 bp的木聚糖酶编码区、102 bp的连接序列编码区和411 bp的碳水化合物结合域(carbohydrate binding module,CBM)编码区,共编码425个氨基酸。氨基酸序列N-末端有1处富含疏水性氨基酸,不存在跨膜结构域;包含31个氨基酸的信号肽(signal peptide)及394个氨基酸的成熟肽(mature peptide),且理化性质稳定;预测的Rua11A空间结构具有11家族木聚糖酶的典型特征,属于CBM第四家族;含有11家族木聚糖酶高度保守的氨基酸片段及催化活性中心(catalytic active center)。结论成功克隆了西门塔尔牛瘤胃木聚糖酶基因Rua11A,并进行了相关序列分析,为Rua11A的异源高效表达及分子改造奠定了基础。
2016年02期 v.29 144-150页 [查看摘要][在线阅读][下载 835K] [下载次数：329 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ]
<正>尊敬的专家、读者、作者及各位同仁:您们好!自2007年8月起,《中国生物制品学杂志》网站(www.zgswj.com.cn,中文域名:中国生物制品学杂志.com)正式运行。本站网页有杂志简介、在线投稿、稿件查询、过期目录、广告合作等您所需要的信息,欢迎登录。
2016年02期 v.29 133页 [查看摘要][在线阅读][下载 37K] [下载次数：11 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] -
<正>第六届疫苗中国发展国际峰会将于2016年4月12~13日在上海隆重召开。作为2016年中国最大的疫苗行业国际年会,这次会议几乎涵盖了整个疫苗产业链上的所有行业。会上将通过人用疫苗及兽用疫苗两个论坛,分别探讨中国及新兴市场疫苗行业的最新发展趋势、研发战略、合作机遇、生产技术等热点话题,同时将与政府权威机构共同探讨国家免疫规划、疫苗审批注册等方面的最新政策动向,旨在通过本
2016年02期 v.29 170页 [查看摘要][在线阅读][下载 34K] [下载次数：33 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] <正>《中国生物制品学杂志》为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。由国家卫生部主管,中华预防医学会和长春生物制品研究所有限责任公司主办,是中华预防医学会系列杂志之一,月刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等
2016年02期 v.29 187页 [查看摘要][在线阅读][下载 33K] [下载次数：5 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] -
<正>《中国生物制品学杂志》于1988年创刊,由中华人民共和国卫生部主管,系中华预防医学会系列杂志之一,为报道我国生物制品研究开发重大成果和最新进展的国内唯一生物制品专业学术期刊。主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。主要设有疫苗研究、基础研究、治疗性制剂、诊断制剂、临床研究、技术方
2016年02期 v.29 224页 [查看摘要][在线阅读][下载 35K] [下载次数：7 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 付洁;王啸林;刘玉杰;张晶;王芳;向慎思;高新;王清清;宋海峰;
目的制备基于前列腺表面膜抗原(prostate surface membrane antigen,PSMA)适配子靶向前列腺癌的双小干扰RNA(small interference RNAs,siRNA)的新型阳离子脂质体,并分析该适配子-脂质体-双siRNA复合物对前列腺癌细胞的靶向性及抑制增殖作用。方法采用逆向蒸发法制备阳离子脂质体-双siRNA[Polo样激酶1(Polo-Like Kinase 1,PLK1)和B7H3(B7-homolog 3)基因]复合物,并对阳离子脂质体、鱼精蛋白与总si RNA比例进行优化。脂质体包裹双siRNA后,通过特异反应插入PSMA适配子A10。对PSMA适配子介导的双siRNA靶向入胞递送系统进行粒径和Zeta电位评价;以LNCap细胞为模型,Western blot法检测脂质体-双功能si RNA对靶基因的沉默效应;基于竞争结合的流式法检测递送系统对靶细胞的亲和性;增殖活性试验检测递送系统体外对前列腺癌细胞的抑制作用。结果阳离子脂质体与总siRNA的最佳比例为300∶1,鱼精蛋白与总siRNA的最佳比例为1.7∶1。A10-脂质体-双siRNA递送系统可以与细胞表面PSMA抗原结合,具有较高的细胞亲和性;对LNcap细胞中PLK1和B7H3基因可以高效沉默;对肿瘤细胞增殖的抑制作用大于单独沉默PLK1或B7H3基因,双沉默siRNA递送系统在抑制肿瘤细胞生长方面具有协同效应。结论制备的PSMA适配子-脂质体-双siRNA递送系统具有前列腺癌细胞靶向性,且在抑癌方面可以发挥协同作用,提示了该双功能siRNA基因治疗药物系统的潜在应用性。
2016年02期 v.29 151-156页 [查看摘要][在线阅读][下载 319K] [下载次数：529 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 巩艳艳;马杰;陈振;朱孟沼;李曼;
目的筛查国内、外静注人免疫球蛋白(human intravenous immunoglobulin,IVIG)和静注巨细胞病毒人免疫球蛋白(human intravenous cytomegalovirus immunoglobulin,CMV-IVIG)制品抗CMV中和抗体效价。方法采用微量细胞病变法检测国内、外IVIG制品及CMV-IVIG抗CMV中和抗体效价,并进行比较。结果国外CMV-IVIG制品Cytogam(3 648 U/g IgG)和Cytotect(3 104 U/g IgG)抗CMV中和抗体效价分别是IVIG制品Privigen(1 048 U/g IgG)和Intratect(980 U/g IgG)的3.5和3.2倍;国内CMV-IVIG制品抗CMV中和抗体平均效价(7 195 U/g IgG)是国内13家企业19批IVIG制品(1 836 U/g IgG)的3.9倍;国内IVIG制品抗CMV中和抗体平均效价是国外IVIG制品Privigen和Intratect的1.8和1.9倍,国内CMV-IVIG制品抗CMV中和抗体平均效价是国外CMV-IVIG制品Cytogam和Cytotect的2.0和2.3倍。结论国内、外的CMV-IVIG制品抗CMV中和抗体效价均为相应IVIG制品3倍以上,采用微量细胞病变法筛查血浆用于制备CMV-IVIG具有可行性,为CMV相关疾病的被动免疫制剂的制备提供了实验依据。
2016年02期 v.29 157-159页 [查看摘要][在线阅读][下载 119K] [下载次数：524 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 赵奇;张梅;孙冰;班博;李亚楠;李艳英;
目的分析可溶性鸟苷酸环化酶(soluble guanylate cyclase,s GC)激活剂cinaciguat对糖尿病大鼠氧化应激的影响。方法用高脂高糖饲料喂养及腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组和cinaciguat低、中、高剂量[3.5、7、14μg/(kg·d)]组。各组大鼠饲养12周,cinaciguat干预14 d后,经下腔静脉采血,采用全自动生化分析仪检测大鼠血糖及血脂水平,比色法检测血清总氧化物歧化酶(superoxide dismu-tase,SOD)活性、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,内皮素(endothelin-1,ET-1)ELISA试剂检测血浆ET-1含量。结果与模型组比较,cinaciguat各剂量组大鼠血糖值下降不明显(P均>0.05);甘油三酯(triglycerides,TG)和总胆固醇(cholesterol,TC)含量均明显降低(P均<0.05);cinaciguat各剂量组SOD活性明显升高,MDA及ET-1含量明显降低。结论 cinaciguat可能具有调节血脂,降低糖尿病大鼠氧化应激水平,改善血管内皮功能的作用。
2016年02期 v.29 160-162+166页 [查看摘要][在线阅读][下载 145K] [下载次数：103 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 程涛;田鑫;曹凤瑞;林琳;付思美;王爽;单元春;陈超;
目的分析2009~2013年吉林省流行性腮腺炎发病情况和流行特征,为制定流行性腮腺炎防控措施提供依据。方法采用描述性方法,对2009~2013年中国疾病预防控制信息管理系统报告的流行性腮腺炎病例和暴发疫情资料进行流行病学特征分析。结果 2009~2013年,吉林省累计报告流行性腮腺炎病例28 778例,平均年发病率为20.98/10万,男女病例性别比为1.64∶1;每年4~7月及11月~次年1月为流行性腮腺炎的高发季节,病例主要集中在3~14岁儿童,占总病例数的74.65%;流行性腮腺炎主要感染对象为学生,占总病例数的62%;9起流行性腮腺炎暴发疫情全部发生在教育机构,其中小学5起,中等教育机构4起。结论吉林省流行性腮腺炎的流行特征有明显的季节性,流行季节时应加强流行性腮腺炎监测工作,对重点人群要加强疫苗预防接种工作,在有暴发疫情时,教育机构应启动晨检工作。
2016年02期 v.29 167-170页 [查看摘要][在线阅读][下载 159K] [下载次数：268 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] - 胡改霞;闫永平;刘新利;蔺淞锋;
目的分析陕西省铜川市乙型肝炎(简称乙肝)疫苗纳入免疫规划前后,0~14岁儿童乙肝流行特征的变化,为进一步探讨防治策略提供依据。方法采用描述性流行病学方法分析乙肝疫苗纳入免疫规划前后,铜川市1991~2014年0~14岁儿童乙肝流行特征及发病趋势。结果免疫规划前铜川市全人群乙肝年平均报告发病率为41.73/10万,其中0~14岁儿童为29.03/10万,占全人群报告病例数的13.21%;免疫规划后全人群乙肝年平均报告发病率为128.27/10万,其中0~14岁儿童为28.20/10万,占全人群报告病例数的2.96%。免疫规划前出生儿童的乙肝疫苗及时全程接种率仅为20.83%,免疫规划后为76.44%,免疫规划前0~14岁儿童乙肝报告发病率有上升趋势,免疫规划后呈下降趋势。全市乙肝发病无明显季节性,男性多于女性,王益区发病率最高。结论铜川市实施儿童乙肝计划免疫后,有效控制了儿童乙肝发病,但较高的乙肝报告发病率说明成人乙肝发病比重较大,应引起我市重视。
2016年02期 v.29 171-174+180页 [查看摘要][在线阅读][下载 173K] [下载次数：115 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 王晓平;陈利军;万毅新;陶红艳;黄晖蓉;武凡祺;张丽;倪京满;
目的分析393例肺癌患者的电子支气管镜检查结果,探讨电子支气管镜在肺癌诊断中的价值。方法对兰州大学第二医院2012~2014年的393例肺癌患者的病历进行回顾性分析,采用SAS 9.3统计软件进行数据统计学分析。结果肺癌的分布右肺多于左肺,上叶多于下叶。393例肺癌患者中,284例镜下表现为管内增殖型,47例管壁浸润型,8例管外压迫型,33例炎症型,18例混合型,3例镜下未见明显异常。其中钳检阳性率94.10%,刷检阳性率60.71%,两者差异有统计学意义(P<0.000 1);鳞癌和小细胞癌钳检的阳性率为96.84%和97.67%,均明显高于腺癌(P<0.000 1),小细胞癌刷检阳性率明显高于腺癌(P<0.05),小细胞癌与鳞癌刷检阳性率差异无统计学意义(P>0.05),鳞癌和腺癌刷检阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。中央型肺癌钳检阳性率(95.72%)高于周围性肺癌(P<0.000 1),中央型肺癌和周围性肺癌刷检阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论电子支气管镜检查具有确诊率高、创伤小及安全性高等优点,是目前肺癌确诊的重要检查方法。
2016年02期 v.29 175-180页 [查看摘要][在线阅读][下载 222K] [下载次数：237 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：19 ] |[阅读次数：0 ]
- 陈凤莲;刘文娟;谢江;张健;黄红梅;凌丹;吴健敏;
目的制备缓释定向释放型IgY微胶囊,并评价其效果。方法采用喷雾干燥法,以明胶、海藻酸钠为微胶囊壁材,制备抗仔猪病原性腹泻IgY微胶囊。以IgY的活性、包封率、体外释放性能及稳定性为评价指标,通过单因素分析和L_9(3_4)正交试验,分别从成囊材料的配比对微胶囊性能的影响、制备微胶囊成囊乳化液的稳定性影响因素以及喷雾干燥条件3方面对IgY微胶囊制备条件进行优化,并评价微胶囊的IgY活性、包封率、在人工胃液(simulated gastric fluid,SGF)和人工肠液(simulated intestinal fluid,SIF)中的缓释效果及稳定性。结果筛选出的制备微胶囊的最佳工艺条件为:明胶浓度4%、海藻酸钠浓度0.75%,按IgY与明胶-海藻酸钠质量比为3∶4加入IgY,乳化后按进风温度170℃,进料速度10 ml/min,干燥时间10 s,出口温度70℃进行喷雾干燥。在此工艺条件下制备的IgY微胶囊包封率为77.4%,活性保持在85%以上;在SGF中2 h释放率为8.6%,在SIF中4 h释放率为81.2%;90℃加热30 s仍可保持50%以上的活性,常温(25~30℃)放置10个月活性仍保持在90%以上,4℃保存10个月活性仅下降5%。结论本工艺制备的明胶-海藻酸钠IgY微胶囊具有生物活性高,稳定性强的特点,且对特异性IgY具有缓释和靶向作用。
2016年02期 v.29 181-187页 [查看摘要][在线阅读][下载 263K] [下载次数：590 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：5 ] |[阅读次数：0 ] - 毕华;史新昌;刘兰;韩春梅;丁有学;裴德宁;饶春明;
目的探讨氨基酸分析的方法对蛋白含量国家标准品定量的可行性。方法采用常规酸水解的方法,通过Hitachi L8800型氨基酸分析仪对白蛋白标准品进行分析。先确定最佳水解时间,再按照最佳水解时间对样品进行水解,通过氨基酸分析,采用氨基酸加合法测定其含量。并验证方法的精密性和准确性。结果经7次测定,求得现行蛋白含量国家标准品[(2005)国生标字0009]的蛋白含量值为(95.02±3.99)mg/100 mg,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为4.20%。多次试验中,标准品中各氨基酸的回收率在93.56%~105.12%之间。推算标准品中白蛋白含量值为20.52 mg,是凯氏定氮测定值的103.48%。结论氨基酸分析法测定蛋白含量自动化程度高,重复性好,可用于重组蛋白含量的分析。
2016年02期 v.29 188-191+196页 [查看摘要][在线阅读][下载 276K] [下载次数：696 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 曹方;王良超;杨玲;潘玲玲;杨乾敏;李强;李洪双;胡洪强;胡文龙;
目的建立ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗多糖含量检测的火箭电泳法,并对该方法进行验证。方法分别用A、C、Y、W135群菌液免疫家兔,制备特异性抗血清,加至琼脂糖凝胶平板中,以定量的各群多糖原液作为抗原参考品进行火箭电泳,用已知的多糖浓度及对应的火箭峰高绘制标准曲线,得出直线回归方程,根据样品的火箭峰高计算多糖含量,确定该方法的检测限,并对该方法进行专属性、线性重复性、准确度、精密度验证;用建立的方法检测3批ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗多糖含量。结果根据该方法绘制的标准曲线呈良好的线性关系,R2均≥0.95;该方法确定样品多糖浓度检测范围为3~7μg/ml,回收率在90%~110%范围内;重复性及不同操作者间的精密度试验结果 RSD均小于5%;特异性好,未检出各群抗原之间的交叉反应。3批ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗多糖含量均符合企业内部《ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗制造与检定规程》的要求。结论建立的火箭电泳方法可用来检测ACYW135群脑膜炎球菌多糖疫苗的多糖含量。
2016年02期 v.29 192-196页 [查看摘要][在线阅读][下载 233K] [下载次数：187 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 李树香;刘敬;王欣怡;徐静;
目的建立呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)抗体效价的3种检测方法,并进行比较。方法棋盘滴定法优化ELISA法的包被抗原及酶标二抗的浓度,并检测该方法的线性范围及重复性;同时建立微量细胞中和试验法和蚀斑减少中和试验法,检测两种方法的重复性。用建立的3种方法及市售RSV抗体ELISA检测试剂盒同时检测55份健康人血清样本,并将两种ELISA法与两种中和抗体效价检测方法间的相关性进行两两比较。结果 ELISA法中包被抗原为10μg/ml及HRP标记的山羊抗人Ig G稀释度为1∶30 000时是最佳组合;在38.00~2.375 U/ml范围内,抗体浓度与A_(450/630)值呈良好线性关系,R~2=0.981 4;高、中、低3个浓度样本的变异系数(CV)均<10%。微量细胞中和试验7 d后,细胞病变明显,细胞成片脱落;连续6次检测抗RSV多克隆抗体中和效价的CV值为4.2%。RSV感染Vero细胞7 d后出现明显的蚀斑形态,结晶紫染色后蚀斑边缘清晰;连续6次检测兔抗RSV抗血清效价的CV值为6.81%。本实验建立的ELISA法与市售ELISA试剂盒的相关系数(R)为0.787,微量细胞中和试验与蚀斑减少中和试验的R为0.937。结论成功建立了3种RSV抗体效价检测方法,本实验建立的ELISA法与市售ELISA试剂盒间及两种中和抗体检测方法间具有良好的相关性。
2016年02期 v.29 197-200+205页 [查看摘要][在线阅读][下载 223K] [下载次数：372 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 黄运中;杨彬;叶驰名;周冬梅;徐军;孙文正;
目的建立测定单抗制剂中聚山梨酯80含量的气相色谱(gas chromatography,GC)方法,并进行方法的优化及验证。方法利用优化后的聚山梨酯80水解条件,用1 mol/L的KOH溶液水解样品中聚山梨酯80,脂肪酸酯键碱水解后定量释放出单油酸,油酸经甲酯化后,采用GC法检测油酸甲酯,根据内标法对样品中聚山梨酯80进行定量分析。对建立的方法进行专属性、系统适应性、线性、精密度、准确度及稳定性验证,并检测3批抗TNFα单抗注射剂中聚山梨酯80的含量。结果当聚山梨酯80和KOH的比例为1∶1时,在40℃水解4 h,水解效果最佳。该方法系统适应性良好,检测聚山梨酯80含量具有专属性;当聚山梨酯80的进样浓度在0.1~4.0 mg/ml范围内,呈良好的线性关系,R~2=0.999 9;两名实验人员制备的共12份供试品的聚山梨酯80浓度的RSD为3.72%;聚山梨酯80低、中、高3个加标浓度的平均回收率分别为105.52%、104.67%和102.51%,RSD为2.37%;处理后样品在27 h内稳定性良好。3批样品中聚山梨酯80的含量分别为1.032、1.016和1.022 mg/ml,分别为标示量的103.2%、101.6%和102.2%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于单抗制剂中聚山梨酯80含量的测定。
2016年02期 v.29 201-205页 [查看摘要][在线阅读][下载 187K] [下载次数：509 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ]
- 张坤明;潘勇兵;张爱华;
人用重组单克隆抗体是一种具有复杂的翻译后修饰的生物大分子,其微观不均一性导致单克隆抗体药物并不是单一纯净的物质,而是多种产品相关物质的混合物,因此,对这些产品相关的变体及其降解方式的进一步研究尤为重要。几乎所有变体均能导致抗体表面电荷分布的差异,电荷变量因此成为监测抗体降解最灵敏的方式,也是对产品质量一致性分析的一项重要参考标准。本文对几种主要电荷变体的成因、检测方法及其对产品有效性影响的研究进展作一综述。
2016年02期 v.29 206-212页 [查看摘要][在线阅读][下载 205K] [下载次数：1137 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：10 ] |[阅读次数：0 ] - 许继伟;宋旋;梁伟姿;杨英;
艾滋病全称获得性免疫缺陷综合征(acquired immunodeficiency syndrome,AIDS),是由人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染引起的,已成为全球性健康难题。HIV通过攻击CD4~+ T细胞而破坏机体的免疫系统,且该病毒易发生突变,使相应疫苗的设计更加困难,诱导中和抗体产生的同时激发机体的细胞免疫将成为开发有效艾滋病疫苗的新思路。本文对HIV的结构特点及疫苗设计、艾滋病疫苗诱导的细胞及体液免疫作一综述,并对该疫苗的开发前景进行展望。
2016年02期 v.29 213-216+220页 [查看摘要][在线阅读][下载 161K] [下载次数：3390 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：0 ] - 朱伟;曹萍;
角质形成细胞(keratinocyte,KC)受损可引起多种皮肤疾病,尖锐湿疣(condyloma acuminatum,CA)即为其中危害较大的一种,且近年感染率呈逐渐上升的趋势。CA皮损KC的培养方法各有不同。从人皮肤中分离KC进行体外培养已有30多年的历史,但由于培养条件和培养方法不同,使结果差异较大。因此,建立一种操作简便、成本低廉、细胞生物活性优良的人KC分离培养方法对CA的治疗具有重要意义。本文对CA患者的皮损KC的研究进展作一综述,为CA的治疗研究提供参考。
2016年02期 v.29 217-220页 [查看摘要][在线阅读][下载 126K] [下载次数：261 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 宋小锋;原增艳;许平辉;
γ-聚谷氨酸(poly-γ-glutamic acid,γ-PGA)是一种具有水溶性、生物相容性、生物可降解性、无毒的聚合氨基酸。本文综述了γ-PGA作为原辅料在治疗用生物制品、预防用生物制品和新型生物材料制品中的应用及其作为稳定剂、冷冻保护剂及絮凝剂在生物制品中的应用,同时展望了γ-PGA在诊断用生物制品方面的应用前景。
2016年02期 v.29 221-224页 [查看摘要][在线阅读][下载 149K] [下载次数：940 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] 下载本期数据