- 时成波;刘红琴;李铮;曹玉锋;王晓庆;
目的构建人源核糖体展示单链抗体(scFV)库。方法从人外周血单个核细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以此为模板,设计多对具有简并性特点的引物,PCR扩增人免疫球蛋白重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,在其两端加上核糖体展示所需元件,并通过重叠PCR法将VH和VL经(Gly4Ser)3短肽连接成单链抗体,构建核糖体展示库。结果利用不同引物进行PCR时,绝大多数引物能扩增出300~400 bp的VH和VL片段;通过大引物扩增成功加上了核糖体展示所需元件,重叠PCR体外连接成约900 bp大小的scFv基因,大量扩增得到核糖体展示库。结论已成功构建了人源核糖体展示scFv库,为人源抗体药物的开发奠定了基础。
2009年07期 v.22 633-638页 [查看摘要][在线阅读][下载 563K] [下载次数:195 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 白志强;李玲;王斌;刘志军;王海涛;钱冬萌;闫志勇;赵巍;宋旭霞;丁守怡;
目的分析人巨细胞病毒(HCMV)感染对人星形胶质瘤细胞凋亡的影响及其细胞内差异蛋白的表达。方法以HCMV AD169株感染U251细胞,复制HCMV体外感染模型,通过RT-PCR和免疫细胞化学技术检测HCMV IE蛋白和结构蛋白pp65的表达。用AnnexinⅤ-FITC和PI染色检测细胞凋亡,通过SELDI-TOF质谱分析感染细胞内差异蛋白的表达。结果HCMV感染后6 h,U251细胞经RT-PCR可扩增出242 bp的IE基因条带,感染后3 d,细胞核内有大量IE蛋白表达,核周及细胞浆内有大量pp65蛋白表达。病毒感染后3 d,约47%的细胞产生凋亡。HCMV感染后细胞内Caspase-8和磷脂酶A2的表达明显增加。结论HCMV感染可能通过上调Caspase-8和磷脂酶A2的表达而诱导U251星形胶质瘤细胞产生凋亡损伤。
2009年07期 v.22 639-642页 [查看摘要][在线阅读][下载 216K] [下载次数:155 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 付双林;张剑涛;赵景伟;罗毅男;王宏磊;
目的观察大鼠颅脑外伤后生长相关蛋白(GAP-43)在中枢神经系统表达的变化,为探讨颅脑外伤后神经元再生和修复机制及临床应用药物治疗颅脑外伤提供理论依据。方法采用液压冲击法建立大鼠脑外伤模型,同时设正常对照组和假手术对照组。成模后取额皮质及海马部位,应用HE染色法观察额皮质区和海马CA1区的病理学改变,免疫组化法检测GAP-43的表达。结果轻、中、重度损伤组大鼠脑组织均出现明显的病理学改变,各损伤组大鼠创伤性颅脑外伤(TBI)后,额皮质区及海马CA1区均于12 h开始出现GAP-43表达增强,3 d后明显增强,1周达高峰,2周时开始降低。GAP-43的免疫反应产物的实际累积光密度值(CIOD)值在TBI 12 h后各时间点均明显高于同期的正常对照组和假手术对照组,中、重度损伤组CIOD值在TBI12 h后明显高于同期轻度损伤组。结论大鼠TBI后,GAP-43的表达增强;TBI损伤越重,其GAP-43的表达越强。
2009年07期 v.22 643-646页 [查看摘要][在线阅读][下载 265K] [下载次数:121 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:5 ] |[阅读次数:0 ] - 金玉玲;张爱华;闭兰;赵亚杰;彭祥兵;孙可芳;
目的原核表达并纯化人T淋巴细胞CD3ε(hCD3ε)链。方法以健康成人外周血单个核细胞总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增人CD3ε链基因,并克隆入pCR-II载体,酶切鉴定及测序分析后,再定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-4T-3-hCD3ε,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经GST亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定。结果酶切分析及DNA测序证实,hCD3ε链基因被正确克隆入pGEX-4T-3载体,并能在原核系统中稳定表达。表达产物的相对分子质量为49 500,0.2 mmol/L IPTG 25℃诱导表达4.5 h,目的蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的29.3%,其中可溶性表达占12.8%。纯化的融合蛋白纯度可达86.1%,可分别被兔抗人CD3ε多抗和羊抗GST多抗识别。结论已成功地原核表达并纯化了GST-hCD3ε融合蛋白。
2009年07期 v.22 647-650页 [查看摘要][在线阅读][下载 233K] [下载次数:138 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 何敏;廖璞;尹一兵;
目的探讨表皮葡萄球菌与人脐静脉血管内皮细胞ECV304的黏附作用及其机制。方法将表皮葡萄球菌临床分离株通过刚果红琼脂检测胞间多糖黏附素(PIA);半定量生物被膜形成试验检测生物被膜表型;并在体外与ECV304细胞共同作用,在倒置显微镜下观察表皮葡萄球菌对ECV304细胞的黏附数。结果表皮葡萄球菌黏附ECV304细胞的数量随作用时间的延长而增加;PIA+/生物被膜表型+菌株与ECV304细胞的黏附数多于PIA+/生物被膜表型-菌株和PIA-/生物被膜表型-菌株,且差异有统计学意义,而PIA+/生物被膜表型-菌株和PIA-/生物被膜表型-菌株与细胞的黏附数差异无统计学意义。结论表皮葡萄球菌与血管内皮细胞的黏附有时间依赖性,能形成生物被膜的表皮葡萄球菌更易与血管内皮细胞黏附。
2009年07期 v.22 651-653页 [查看摘要][在线阅读][下载 146K] [下载次数:90 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 劳凤学;商迎辉;刘端祺;
目的探讨白藜芦醇对Burkitt B淋巴瘤Raji细胞的增殖抑制作用及诱导死亡途径。方法用白藜芦醇处理Raji细胞,透射电镜及MDC染色检测细胞死亡;Western blot法检测Caspase-3、细胞色素c及CathepsinD蛋白的表达。结果白藜芦醇可明显抑制Raji细胞增殖,电镜观察细胞内出现了大量的自噬小泡,MDC染色后细胞点块状荧光结构明显增加。Western blot分析显示,白藜芦醇可引起细胞色素c从线粒体释放,但释放量与Jurkat细胞相比明显减少,且不能导致Caspase-3的活化。Cathepsin D活性成分32kD片段随白藜芦醇处理时间的延长而减少。结论白藜芦醇可抑制Raji细胞增殖,并通过Caspase非依赖途径诱导细胞自噬死亡。
2009年07期 v.22 654-658页 [查看摘要][在线阅读][下载 277K] [下载次数:555 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:21 ] |[阅读次数:0 ] - 黄栋;任伟;张素华;邵伟;
目的构建胰岛素启动子肌腱膜的纤维肉瘤肿瘤基因同系物A(MafA)基因的真核表达质粒,并观察MafA基因在人肝癌细胞HePG-2中的表达及其作用,为糖尿病基因治疗的研究奠定基础。方法提取小鼠胰腺组织总RNA,经RT-PCR扩增MafA基因片段,克隆至真核表达载体pEGFP-N2和pEGFP-C1中。用脂质体将重组表达质粒转染至人肝癌细胞HePG-2中,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR检测转染细胞中MafA和insulinⅡ基因的转录水平,Western blot检测融合蛋白EGFP-MafA的表达。结果重组表达质粒pEGFP-N2/MafA和pEGFP-C1/MafA经PCR、双酶切和测序证明构建正确;重组质粒转染的HePG-2细胞有绿色荧光蛋白表达;经RT-PCR可检测到MafA基因表达,但未检测到insulinⅡ基因表达;经Westernblot检测,在相对分子质量约70 000处可见特异性反应条带。结论已成功构建了MafA基因真核表达质粒pEGFP-N2/MafA和pEGFP-C1/MafA,以其转染的HePG-2细胞可表达MafA基因,并翻译成蛋白,但未表达insulinⅡ基因。
2009年07期 v.22 659-662+666页 [查看摘要][在线阅读][下载 229K] [下载次数:106 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 任琦;宋之明;刘丹;孙洋;于海鹏;李娟;富锐丽;刘英;盛军;
目的构建霍乱毒素B亚单位(CTB)植物细胞表达载体,并在人参细胞中进行表达。方法根据人参偏爱密码子,采用引物延伸PCR法合成CTB基因,连入pBI121质粒,构建植物细胞表达载体,转化人参细胞后,采用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定。结果测序结果表明,PCR法合成的目的基因序列与设计完全一致,构建的植物细胞表达载体经双酶切鉴定显示,所含基因片段大小与预期相符。提取转基因人参细胞基因组DNA和mRNA,分别进行PCR和RT-PCR鉴定,均可见约400 bp的特异性片段。Western blot分析可见相对分子质量约12 000的特异性条带。结论已成功构建了含霍乱毒素B亚单位的植物细胞表达载体,并在人参细胞中获得表达。
2009年07期 v.22 663-666页 [查看摘要][在线阅读][下载 178K] [下载次数:131 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 张开俊;杨莉;
目的在大肠杆菌中表达Serratia marcescens非特异性核酸内切酶(SMNE),并进行纯化、活性检测及应用。方法合成smne基因,应用PCR技术在基因的5′端引入6个组氨酸标签序列,将其插入分泌表达载体pET-20b(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。表达产物经镍离子螯合琼脂糖凝胶一步纯化后,检测其活性并计算比活。将纯化的SMNE用于重组腺病毒的制备,对外源性核酸进行降解,并采用Southern blot对外源性DNA残留量进行测定。结果重组表达质粒pET-20b-smne经PCR、双酶切和测序证明构建正确。重组蛋白的表达量为8.0 mg/L,纯化后纯度达95%,比活达1.1×106 U/mg。在重组腺病毒制备过程中使用后,成品中的外源性DNA残留量≤10 ng/5.0×1011 VP。结论已成功地在大肠杆菌中表达了SMNE,纯化的SMNE活性高,有望应用于重组生物制品制备过程中外源性核酸的去除。
2009年07期 v.22 667-670页 [查看摘要][在线阅读][下载 246K] [下载次数:328 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:0 ] - 孙珊;张德纯;褚巧芳;
目的探讨双歧啤酒对肥胖大鼠的减肥作用及其机制。方法通过喂食高脂饲料,建立肥胖大鼠模型。将模型大鼠随机分成双歧啤酒组(饮用双歧啤酒)、市售啤酒组(饮用市售啤酒)、肥胖组(饮用纯净水)3组,另设正常对照组(饮用纯净水),每组10只。4组大鼠均喂食4周基础饲料后处死,检测各组体重、体脂、食物利用率(FE)、血葡萄糖(GLU)、血总胆固醇(TCHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、血瘦素(Leptin)和血胰岛素(Insulin)水平以及粪便双歧杆菌活菌的含量。结果与肥胖组相比,双歧啤酒组大鼠的腹膜后脂肪/体重、TG和GLU水平均明显下降,粪便双歧杆菌的含量明显增加,而市售啤酒组与肥胖组相比,上述指标均无显著性变化,且双歧啤酒组大鼠的腹膜后脂肪/体重、GLU和胰岛素水平与正常组大鼠相比,差异无统计学意义。结论双歧啤酒能够促进大鼠肠道双歧杆菌的增长,调节脂肪贮存和糖、脂代谢。
2009年07期 v.22 671-675页 [查看摘要][在线阅读][下载 188K] [下载次数:239 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 游勇飞;岑建宁;张积仁;姚素娟;郭敏;赵恒;
目的研究太空诱变对α-溶血性链球菌多糖分子表达的影响。方法采用改良的过碘酸钠法将辣根过氧化物酶(HRP)分别标记在刀豆凝集素(ConA)、麦胚凝集素(WGA)、接骨木凝集素(SNA)、蓖麻凝集素Ⅰ(RCA-Ⅰ)及植物血凝素(PHA)上,合成HRP-凝集素,检测普通型α-溶血性链球菌及太空型链球菌菌体内多糖分子的表达水平。结果太空型链球菌菌体内末端为ConA、SNA及RCA-Ⅰ所识别的多糖分子含量较普通型α-溶血性链球菌高,且差异有统计学意义;末端为WGA及PHA所识别的多糖分子含量,普通型α-溶血性链球菌较太空型链球菌稍高,但差异无统计学意义。结论太空诱变对细菌的多糖分子表达具有调控作用,为细菌多糖制品的筛选及其性能和产量的提高提供了新的途径。
2009年07期 v.22 676-678页 [查看摘要][在线阅读][下载 134K] [下载次数:100 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 周密;李凡;
目的对柯萨奇B4病毒(CVB4)jlu06株进行基因序列及遗传进化分析,并探讨其与致病相关的分子基础。方法Trizol法提取病毒RNA,RT-PCR扩增目的基因片段,测定基因组全序列,并进行序列同源性及遗传进化分析。结果CVB4 jlu06株基因组全长7 395个核苷酸,编码2 183个氨基酸,与其他CVB4株的同源性较高,且发生了10个氨基酸的变异,与HumanCB4和POLG_CXB4亲缘关系较近,与CXB2亲缘关系较远;CVB4 jlu06株与具有潜在致糖尿病性病毒株,在非结构蛋白3A区4个位点有共同的氨基酸,与非致病毒株不同。结论CVB4 jlu06株具有典型的CVB4基因组特征,在非结构蛋白3A区发生的核苷酸和氨基酸变异可能与其致病性相关。
2009年07期 v.22 679-681页 [查看摘要][在线阅读][下载 135K] [下载次数:78 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ]
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<正>由中国药品生物制品检定所副所长王军志研究员主编的《生物技术药物研究开发和质量控制》一书自2002年10月首次出版以来,在生物技术药物领域获得了广泛好评。应科学出版社约稿和广大读者要求,主编及编委们对原著进行了补充和修订。第二版仍分为上下两篇,共30章。上篇系统地介绍了生物技术药物的研制、开发和非临床研究的全过程以及贯穿于全过程的质量控制要点和技术要求,同时在原有内容基础上,增加了生物技术药物药效学研究和临床观察的章节,并
2009年07期 v.22 638页 [查看摘要][在线阅读][下载 35K] [下载次数:30 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] <正>《中国生物制品学杂志》于1988年创刊,由中华人民共和国卫生部主管,系中华预防医学会系列杂志之一,为报道我国生物制品研究开发重大成果和最新进展的国内唯一生物制品专业学术期刊。主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床学等方面的研究、生产、使用和质控等学术文章。主要设有基础研究、预防制品、治疗制品、诊断制品、实验技术、临床
2009年07期 v.22 642页 [查看摘要][在线阅读][下载 36K] [下载次数:14 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] -
<正>本刊刊号:CN11-4395/R,ISSN 1009-0959,广告经营许可证:京西工商广字第0111号。国家食品药品监督管理局主管,国家食品药品监督管理局信息中心主办。2009年为月刊,大16开本,160页,每册定价23元。邮发代号2-492。读者可在附近邮局订阅或拨打"11185"电话订阅。开户名:国家食品药品监督管理局信息中心
2009年07期 v.22 658页 [查看摘要][在线阅读][下载 34K] [下载次数:13 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] <正>《中国药学大辞典》收集词汇近26 000条,涉及药用动物、植物、矿物、中药和方剂、药用化学物质、化学药物、药剂学、药物化学、中药学和生药学、微生物药学、生物药学、药物分析、药理学和毒理学、医院药学、临床药学、药学史、药事管理、信息科学、药学相关学科和专业、技术和设备、教育学名词等方面内容。定价352元。联系方式
2009年07期 v.22 670页 [查看摘要][在线阅读][下载 47K] [下载次数:7 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] -
<正>为促进我国免疫诊断与疫苗技术的发展,加强有关学科的经验交流和沟通,中华医学会微生物学与免疫学分会和中华预防医学会生物制品分会决定于2009年10月在贵阳召开第四次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会。大会将邀请国内外知名专家作专题报告,欢迎从事相关科研、教学、医疗、疾控、检验检疫以及诊断试剂和仪器研发和生产等方面的专家、学者踊跃投稿并参加研讨。未公开发表的论文经专家评审,将择优向《中华微生物学和免疫学杂志》、《中国生物制品杂志》等国内相关期刊推荐。出席会议者授予国家I类继续教育学分10分。
2009年07期 v.22 675页 [查看摘要][在线阅读][下载 35K] [下载次数:10 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] <正>中华预防医学会拟于2009年11月初在北京召开第三届学术年会(以下简称学术年会)。"全球华人公共卫生协会第四届年会"和"世界公共卫生联盟西太区公共卫生大会"将同期召开。本次会议将针对预防医学和公共卫生领域与社会经济协调发展中的热点和重点问题进行研讨和交流,介绍预防医学新技术、新成果和新进展,展望公共卫生发展前景,促进预防医学和公共卫生学科发展,为科技和经济发展、构筑和谐社会服务。
2009年07期 v.22 685页 [查看摘要][在线阅读][下载 43K] [下载次数:8 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] -
<正>尊敬的专家、读者、作者及各位同仁:您们好!自2007年8月起,《中国生物制品学杂志》网站(www.zgswj.com.cn,中文域名:中国生物制品学杂志.com)正式运行。本站网页有杂志简介、在线投稿、稿件查询、过期目录、广告合作等您所需要的信息,欢迎登录。
2009年07期 v.22 691页 [查看摘要][在线阅读][下载 37K] [下载次数:14 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] <正>《中国生物制品学杂志》为报道我国生物制品研究开发重大成果和国内外最新进展的国内唯一的生物制品专业学术期刊。由国家卫生部主管,中华预防医学会和中国生物技术集团公司长春生物制品研究所主办,是中华预防医学会系列杂志之一,月刊。本刊主要刊载生物制品和生物技术产品相关领域,如预防医学、免疫学、微生物学、生物化学、流行病学、临床医学等
2009年07期 v.22 715页 [查看摘要][在线阅读][下载 47K] [下载次数:6 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] -
<正>由国家药典委员会组织中国生物制品领域众多知名专家主编、中国生物制品集团公司协编的《英汉-汉英生物制品学词汇》,已由科学出版社于2008年第四季度出版。本书是我国第一部综合生物制品所涉及的有关分支学科词汇的工具书,包括英汉和汉英两部分,收录有病毒学、细菌学、微生物
2009年07期 v.22 718页 [查看摘要][在线阅读][下载 37K] [下载次数:13 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] <正>为方便临床医生合理选用药物,以及便于医药科研、经营工作者学习与掌握有关药物知识,同时顺应国家食品药品监督管理局逐步加强对药品说明书的规范和管理形势,我们在工作实践中收集、筛选、整理了临床使用药物,编辑出版了《实用药品正异名词典》一书。收集了中、英文药名共计47 000余条,包括中文名称、英文名称、异名、药理作用等内容。收载内容广泛,查询方便快捷。定价280元。
2009年07期 v.22 721页 [查看摘要][在线阅读][下载 37K] [下载次数:7 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] -
<正>《中国药学术语词库与主题词表》是科技部的重点科技基础性项目。书本产品《中国药学主题词表》是我国第一部涵盖药学及其相关学科主题词的主题词表。对图书文献的编辑、出版、标引、编目、建库、查新、文献数据库建设、数据库检索、咨询服务、信息交换和国内外学术交流等起着重要作用。《中国药学主题词表》共收录正式主题词34000多条,非正式主题词近20000条。精装本上、下册,定价570元。
2009年07期 v.22 733页 [查看摘要][在线阅读][下载 44K] [下载次数:7 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ]
- 吴娟;魏和平;许远;
<正>原花青素是植物体内一类在热酸处理下能产生红色花色素的多酚类化合物,是一种天然抗氧化剂,广泛分布于葡萄籽、松树皮、蚕豆皮中。目前,原花青素已作为主要活性成分,添加于药品及食品营养补充剂中。利用葡萄籽、葡萄皮、茶叶、树皮、山楂皮等提取原花青素的报道较多,但利用油菜籽皮提取的报道较少。本实验以油菜籽皮为原料,采用多因素分析方法提取原花青素,并分析提取剂种类、浓度、料液比、提取时间等因素对提取效果的影响。现将实验结果报道如下。
2009年07期 v.22 678页 [查看摘要][在线阅读][下载 43K] [下载次数:207 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:0 ] - 孟日增;石建平;肖成蕊;刘晶;郭娜;潘风光;
目的建立鸭瘟病毒PCR检测方法,并进行验证。方法根据GenBank中登录的鸭瘟病毒基因(UL30、UL31)序列,设计合成1对特异性引物,以鸡胚化弱毒疫苗株病毒基因组DNA为模板,进行PCR扩增。优化PCR的反应条件,并对方法的敏感性、特异性及适用性进行验证。结果经PCR可扩增得到446 bp的目的基因条带,测序结果与已发表的序列同源性达100%。该方法的最低检出限为2.1 pg,对7种鸭易感性病原体及3种鸭瘟病毒同类病原体的检测结果均为阴性。结论已建立了敏感、特异、快速的鸭瘟病毒PCR检测方法。
2009年07期 v.22 709-712页 [查看摘要][在线阅读][下载 172K] [下载次数:274 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:0 ] - 王亚军;戚凤春;薛向光;李晓波;王丽娜;谢琳;王宇;夏青娟;隋波;张梅;魏涛;郭立君;
目的建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,并进行初步应用。方法采用狂犬病病毒CTN-1V纯化抗原免疫家兔,制备多克隆抗体,作为酶标抗体,马抗狂犬血清纯化抗体作为包被抗体,建立双抗体夹心ELISA法。对该方法进行验证,检测狂犬病病毒原液毒力和疫苗效力,并与小鼠(NIH)法检测结果进行对比。结果双抗体夹心ELISA检测方法的最低检出限为0.17 IU/ml,最佳线性范围为0.17~2.00 IU/ml,相关系数R>0.97;批间及试验内变异系数均小于10%,特异性、稳定性均良好;检测20批病毒原液毒力及疫苗效力,结果与NIH法相比,差异无统计学意义。结论已建立狂犬病病毒抗原ELISA检测方法,可用于生产过程中狂犬病疫苗原液和半成品的检定。
2009年07期 v.22 713-715页 [查看摘要][在线阅读][下载 139K] [下载次数:347 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:0 ] - 郭长福;张囡;李茜;黎维勇;孙可芳;胡豫;张爱华;
目的建立检测人血清中抗鼠抗体(HAMA)的间接ELISA法,并进行临床标本检测。方法采用间接ELISA法,选择最佳实验条件,确定阴阳性血清判定的界值,并进行方法学验证;用该方法检测WuTacⅠ期临床观察的健康志愿者血清抗鼠抗体。结果间接ELISA的最佳试验条件为:抗原包被浓度0.313μg/ml,血清稀释度1∶160,酶标抗体稀释度1∶80 000;阴阳性血清界值为0.210;该方法检测HAMA阳性标本的试验内和试验间变异系数分别为7.46%和5.48%,检测HAMA阴性标本的试验内和试验间变异系数分别为8.03%和14.7%;与马、山羊、兔、猴等动物血清无交叉反应;健康志愿者HAMA约在用药后10~14 d产生。结论已成功建立了检测人血清中抗鼠抗体的间接ELISA法,符合我国生物药品临床试验检测的要求。
2009年07期 v.22 716-718页 [查看摘要][在线阅读][下载 141K] [下载次数:194 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 佘朝晖;孙爱农;
目的探讨一种低浓度红细胞同种抗体浓缩提纯的方法。方法采用液态氯化钙-草酸钾法("钙-草"法)或凝血酶法去除血浆中纤维蛋白,使血浆转化成血清,再经聚乙二醇(PEG)法浓缩提纯。对浓缩提纯的终产品进行各项质量指标检测及初步应用。结果处理的8份抗-M、N、S血浆("钙-草"法)、4份抗-D、E血浆("钙-草"法)及15份抗-A、B血浆(凝血酶法和"钙-草"法)成功去除了血浆中的纤维蛋白,转化成血清,浓缩提纯的终产品各项质量指标均合格,检测献血者红细胞和血型的结果与市售试剂一致。结论以"钙-草"法去除血浆纤维蛋白,PEG法浓缩提纯血型抗体操作简便,成本低,便于推广使用。
2009年07期 v.22 719-721页 [查看摘要][在线阅读][下载 113K] [下载次数:125 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 印君;尹宗宁;
目的探讨超氧化物歧化酶(SOD)的固定及固定化SOD活性的检测方法。方法以淀粉为载体,对SOD进行固定,采用改进的邻苯三酚测活法(以Vc为终止剂),并结合过滤或离心的方法去除沉淀,测定固定化SOD的活性。比较过滤法与离心法,及过滤法与经典邻苯三酚法测定酶活性的差异,并检测过滤法的线性、精密性和准确性。结果过滤法检测SOD活性的精密性较离心法高,与经典邻苯三酚法检测结果差异无统计学意义,在SOD浓度为6~60μg/ml范围内,SOD活性值与浓度线性关系良好(r=0.999 5),精密性及准确性良好。固定化SOD的比活性为1 730.07 U/g,酶活回收率为53.3%。结论以淀粉为载体固定化SOD效果好,经改进的邻苯三酚法可用于固定化SOD的活性测定。
2009年07期 v.22 722-724页 [查看摘要][在线阅读][下载 145K] [下载次数:617 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ]
- 杨进;叶强;董柏青;龚健;崔萱林;杨明;廖和壮;张杰;RionLeon Ochiai;Ali Mohammad;John Clemen;
目的观察A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗大规模接种后的速发接种反应。方法以A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗为观察组,伤寒Vi多糖疫苗为对照组,按组群随机分层配对的原则,将观察现场分为108个组群,观察组和对照组各分配54个组群进行接种。建立接种反应监测系统,按统一表格和方法对两组的速发接种反应进行监测。结果两组共接种34 543人,其中A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗接种18 167人,伤寒Vi多糖疫苗接种16 376人。A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗速发接种反应率为0.44‰;伤寒Vi多糖疫苗速发接种反应率为0.79‰,二者差异无统计学意义;速发接种反应均出现在接种后15 min内,最早的出现在接种后5 min,速发接种反应中有2例为异常反应,但未出现严重反应。结论A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗速发接种反应发生率低,预后良好。
2009年07期 v.22 699-701页 [查看摘要][在线阅读][下载 126K] [下载次数:140 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:0 ] - 孙会来;方捍华;李荣成;陈震;邱平;李艳平;农艺;文玉屏;朱昌林;
目的观察国产冻干水痘减毒活疫苗的接种反应及免疫原性。方法选择460名观察对象,于接种后30min、6h、24 h、48 h、72 h、4~10 d进行随访,观察一般反应和异常反应,通过电话和自动报告收集30 d内的异常反应。采用膜免疫荧光抗体法(FAMA)检测观察对象免疫前后的抗水痘-带状疱疹病毒(VZV)抗体水平,并计算抗体阳性率、抗体几何平均滴度(GMT)及增长倍数。结果460名观察对象接种疫苗后,在观察期未观察到严重的局部反应和全身反应,也未观察到异常反应,抗体总阳性率为98.31%,免疫后抗体GMT水平平均为147.38,比免疫前提高38.18倍。6~12岁组免疫后抗体GMT水平高于1~5岁组,且差异有统计学意义。结论国产冻干水痘减毒活疫苗具有良好的安全性和免疫原性。
2009年07期 v.22 702-704页 [查看摘要][在线阅读][下载 124K] [下载次数:214 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:9 ] |[阅读次数:0 ] - 粟玉萍;苏湘晖;代敏;刘锋;李肖雄;
目的调查岳阳市无偿献血人群Rh血型系统的表型,建立Rh阴性献血者档案库。方法使用Rh血型定型试剂,采用平板法进行初筛,结果可疑者用试管法确认。初筛阴性标本送血型参比室做确认试验,并进行Rh因子C、c、E、e和不规则抗体筛选。结果在183 596名无偿献血者中共筛出RhD阴性献血者404名(0.22%),弱D 5名(0.003%)。404名Rh阴性献血者中共检出A型112名(27.7%),B型112名(27.7%),O型128名(31.7%),AB型52名(12.9%)。表型共7种:ccdee 212名(52.5%),Ccdee 124名(30.7%),CCdee 30名(7.4%),ccdEe 18名(4.4%),ccdEE 8名(2.0%),CcdEe 8名(2.0%),CCdEe 4名(1.0%)。结论已建立了岳阳市Rh阴性献血者档案库。
2009年07期 v.22 705-706页 [查看摘要][在线阅读][下载 87K] [下载次数:58 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:0 ] - 巫远忠;张丽科;刘瑞玉;钟伟强;
目的探讨慢性肾功能不全(尿毒症期)患者血清白细胞介素-18(IL-18)和可溶性血管细胞黏附分子-1(sV-CAM-1)的水平及其临床意义。方法应用ELISA法检测10例慢性肾功能不全(尿毒症期)患者经维持性血液透析治疗前和治疗10 d后,血清IL-18和sVCAM-1的水平,并与正常对照组进行比较。结果慢性肾功能不全(尿毒症期)患者血清IL-18和sVCAM-1的水平治疗前均明显高于正常对照组;治疗10 d后仍明显高于治疗前。结论高水平的IL-18和sVCAM-1可能与慢性肾功能不全(尿毒症期)的发病机制有关,而且可能参与透析治疗相关并发症的发生发展。
2009年07期 v.22 707-708+712页 [查看摘要][在线阅读][下载 124K] [下载次数:81 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:4 ] |[阅读次数:0 ]