甲型肝炎病毒(H2株)快速适应变异株全基因序列分析

目的 探索甲型肝炎病毒（Ｈ２株）细胞适应的分于机制。方法 将甲型肝炎减毒活疫苗毒株（ＨＡＶ Ｈ２Ｋ７）在人胚肺二倍体细胞ＫＭＢ１７上快速连续传代增强适应（１４ｄ），检测连续传代后抗原滴度和感染性滴度，测定 第１８代（ＨＡＶ Ｈ２Ｋ７Ｐ１８）全基因组序列。结果 适应至第１８代抗原滴度达１：５１２，感染性滴度为７．５ＬｏｇＣＣＩＤ５０／ｍｌ。 整个基因组出现了１０个核苷酸突变，变异卒为０．１３％，变异较大区域位于５’末端非编码区（５’ＵＴＰ），有３个核苷酸 变异。编码区７个交变，２个是无义突变，５个有义突变导致５个氨基酸变化，分别位于 ＶＰ２ Ａ－Ｓ；２Ｃ，Ｑ－Ｐ；３Ａ，Ｒ－ Ｃ；３Ｃ，Ｔ－Ａ和３Ｄ，Ｖ－Ｇ。结论 ＨＡＶ Ｈ２Ｋ７４因组５’ＵＴＲ、２Ｃ区、３Ａ区、３Ｃ区和３Ｄ区变异协同作用促进在 ＫＭＢ１７ 细胞上快速增强适应。

绿色荧光蛋白和白介素-2在卡介菌中的共表达

目的 构建能复合表达绿色荧光蛋白和白介素－２重组卡介菌（ｒＢＣＧ０ＧＦＰ－ＩＬ－２）。方法 采用基因 工程技术构建ｐＤｍＧＦＰ－ＩＬ－２重组穿梭质粒，用电穿孔法将重组质粒ｐＤＭＧＦＰ－ＩＬ－２转化大肠杆菌和卡介菌中，采用限制酶 切，荧光显微锐下观察及ＰＣＲ方法鉴定 ｐＤｍＧＦＰ－ＩＬ－２和 ｒＢＣＧ－ＧＦＰ－ＩＬ－２。结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示 ｐＤｍＧＦＰ－１１．２质 粒的限制酶切条带，ＰＣＲ法检测重组ＢＣＧ菌株可见明显ＩＬ－２片段扩增条带约０．３ｋｂ，ｒＢＣＧ－ＧＦＰ－ＩＬ－２液体培养菌液在长 波紫外线的照射下，发出明亮的绿色荧光，小鼠皮下接种ｒＢＣＧ－ＧＦＰ－ＩＬ－２．１周后，取组织冰冻切片在荧光显微镜下可见 绿色荧光。结论 成功构建了重组质粒ｐＤｍＧＦＰ－ＩＬ－２和共表达绿色荧光蛋白和白介素－２重组ＢＣＧ（ｒＢＣＧ－ＧＦＰ－ＩＬ－２）。

新型精制三价流行性感冒灭活疫苗在长春生物制品研究所投产新闻发布会在京举行

流行性乙型脑炎病毒减毒株at222的生物学特性

目的 分析乙型脑炎病毒减毒株ａｔ２２２生物学特性，并与亲代野生强毒株ＡＴ２１进行比较。方法 ａｔ２２２株和 ＡＴ３１株在伊蚊细胞Ｃ６／３６上繁殖，培养上清用作病毒液，在Ｖｅｒｏ细胞上以病毒蚀斑法测定病毒滴度，以 小鼠脑内感染法测定其神经毒力。结果ａｔ２２２株在蚊细胞上生长缀慢，但仍可达到与其亲代强毒株相似的滴度， 即ｌ０８ＰＦＵ／ｍｌ。在Ｖｅｒｏ细胞上形成蚀斑比其亲代野生强毒株ＡＴ３１明显小，脑内感染小鼠不致死，而ＡＤＩ株却表现 出了极强的神经毒力。结论 对乙型脑炎病毒减毒株出ａｔ２２２的生物学特性进行了全面分析，为研究和开发乙型脑炎 疫苗提供理论依据。

Vero、CHO和杂交瘤细胞在生物反应器中的生长和代谢

目的 研究Ｖｅｒｏ、ＣＨＯ和杂交瘤细胞在生物反应器中的生长和代谢。方法 应用搅拌式生物反应 器，培养了Ｖｅｒｏ、ＣＨＯ和鼠杂交瘤７Ｈ３细胞，对营养物质及代谢产物进行定量分析．测定各个培养中发酵相关参数。 结果 培养过程中葡萄糖和谷氨酰胺的摄取与培养液中两者的浓度正相关。控制营养物质的加入可提高细胞产 量。结论Ｖｅｒｏ、ＣＨＯ和７Ｈ３细胞在生物反应器培养中有相同的生长和代谢模式。

LHRH-PE40注射剂对体外培养人肿瘤细胞系的细胞毒作用

目的 观紊ＬＨＲＨ－ＰＥ４０注射剂对体外培养的人肿瘤细胞的细胞毒作用。方法 用ＭＴＴ检恻 ＬＨＲＨ－ＰＥ４０对体外培养的人肿瘤细胞的细胞毒作用，找出敏感肿瘤细胞系。结果ＬＨＲＨ－ＰＥ４０对体外培养的多 种人肿庙细胞具有细胞毒作用，细胞对药物的敏感程度依次为：ｓｍｍｕｕ７７２１（人肝癌）＜ＨＥＰＧ２（人肝癌）＜ＨＣＴ－８(人结肠癌）＜ＭＣＦ－７（人乳腺癌）＜Ａ５４９（人肺腺癌）＜ＭＧＣ－８０３（人胃癌）。结论 为动物体内的药效学研究和临 床用药提供依据。

重组人粒细胞集落刺激因子活性测定标准品的研制

目的 建立效价检测用的重组人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）国家标准品。方法 标准品按 ＷＨＯ有关要求进行制备、分装、冻干、检测，用Ｇ－ＣＳＦ国际标准品为标准进行协作标定。结果 冻干重组人Ｇ－ ＣＳＦ标准品经检测，外观、无菌实验合格，水分为０．９０％，加速热稳定实验表明其生物学活性在－２０、４和２５℃条件 下２０个月保持稳定。该标准品经４家实验室协作标定共３２次测定，加权平均效价为 ５．１５×１０６ＩＵ／支；几何平均效 价为 ４．９１×１０６ＩＵ／支。实验均数的９５％可信区间为４．６４×１０６～５．２０×１０６ＩＵ／支，单次实验的９５％参考值范围为 ３．４５×１０６～６．４７×１０６ＩＵ／支，平均可信限卒为５．４６％。结论 该批重组人Ｇ－ＣＳＦ国家标准品各项指标均符合要 求，可作为国家标准品使用，效价定为５．０×１０６ＩＵ／支，编号为９８／０１。

低浓度单克隆抗体的分离纯化

目的 从杂交瘤细胞的培养上清中纯化低浓度单克隆抗体。方法 采用离子交换层析与凝胶过 滤相结合进行分离纯化。结果 纯化的ＩｇＧ抗体纯度＞９０％，总回收率为３４％。结论 除了杂蛋白的等电点与目 的蛋白相近的情况外，这种方法可应用于低浓度蛋白的分离纯化。

干扰素口含片剂的研制

肺炎球菌荚膜多糖的稳定性

目的 了解２３个型的肺炎球菌荚膜多糖的稳定性。方法 分别用Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ２Ｂ或４Ｂ凝胶柱测定 相对分子质量及其分布（Ｋｄ）。结果 用蓝色葡聚糖２０００和氧化钠作标准测定外水体积Ｖｏ（１５２．５６或１５４．０４ｍｉｎ）和 内水体积Ｖｔ（４３２．２３或４４４．０７ｍｉｎ），均有良好的分离效果。于２～８℃保存的所有型别的多糖均符合规程要求，除１、 ２、４、８、１２Ｆ、１４、１８Ｃ和２３Ｆ型多糖因基础相对分子质量较大有轻微降解外，其他均未发现有明显降解；于室温保存的 多糖除１、２、８、１２Ｆ、１４和１８Ｃ型有轻微降解外，其他型多糖降解程度均较大；于３７℃保存的多糖除１、２、８、１２Ｆ和１４ 型有轻微降解外，其他型则有更大程度的降解。结论 高温不利于多糖的保存。２３个型别的液态多糖于２～８℃保 存１年均稳定。

应用RP-HPLC法测定疫苗中2-苯氧乙醇的含量

目的 建立一种检测２－苯氧乙醇含量的方法。方法 采用反相高效液相层析（ＲＰ－ＨＰＬＣ）方法。 结果 检测结果准确、稳定，线性关系好，重复性高。结论 可用于疫苗中２－苯氧乙醇含量检测。

应用无血清培养中试的三批WuT3单抗的质量分析

血浆纤维结合蛋白修复皮肤创伤的临床应用

目的 观察血浆纤维结合蛋白修复皮肤创伤的临床效果。方法６０例皮肤创伤患者随机分成两 组，Ｆｎ观察组和红汞对照组，创面做常规清洗后，分别涂Ｆｎ制剂及红汞。结果　Ｆｎ观察组用药次数少，平均２０次 左右，平均停止渗出时间为９．５ｈ，平均愈合时间为５ｄ，一期愈合率为９０％，无一例感染，而且止痛效果较好。结论 Ｆｎ制剂修复皮肤创伤临床疗效优于红汞。

浅谈下一代制造系统