不同代次S191株麻疹病毒HA基因的序列分析

目的　考察麻疹S191疫苗株在长期传代过程中HA基因的变化 ,以确定用于生产的最佳代次。方法　对麻疹S191疫苗株鸡胚细胞系 (CEC) 2 0、30代病毒株及S191株羊膜系病毒株 (强毒 )HAM42的血凝蛋白 (HA)基因进行RT—PCR ,克隆到PUC质粒后进行测序。结果　 2 0代和 30代疫苗的HA基因的 185 4个碱基序列中未出现核苷酸的变化 ,但二者与HAM42株相比有两个核苷酸的变化 ,分别在 15 17和 1799位 ,并导致 5 0 6位的Gly变为Asp ,6 0 0位的氨基酸由Glu变为Val。结论　麻疹病毒的减毒株与强毒株存在差异。而麻疹减毒株在鸡胚细胞的长期传代中 ,HA基因未出现明显变化 ,没有出现抗原漂移 ,30代毒株与 2 0代毒株是一致的

钩端螺旋体外膜蛋白基因重组载体构建及在卡介菌中的表达

目的　研制一种高效广谱的新型钩体疫苗。方法　用PCR方法扩增致病性钩端螺旋体赖型 0 17株外膜蛋白OmpL1基因 ,将其克隆入大肠杆菌—分枝杆菌穿梭质粒载体pMV2 6 1和pMV36 1中。结果　筛选到两个重组载体pBQ1和pBQ2 ,通过电穿孔导入卡介菌 ,重组体经诱导表达了相对分子质量约为 35 0 0 0的融合蛋白。结论　卡介菌能有效表达钩体抗原蛋白

丙型肝炎病毒E2抗原基因的克隆、表达及纯化

目的　为了获得大量重组HCVE2蛋白 ,以研究E2抗体潜在的保护作用。方法　利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出 931bp的E2基因片段 ,经EcoRI和Sall双酶切后连接到pET 2 8a表达载体上 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)菌株 ,得到重组质粒PET -E2 ,工程菌经IPTG诱导培养 ,明显表达出HCVE2蛋白 ,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化 ,用ELISA方法检测生物学活性。结果　表达产物主要以包涵体形式存在 ,表达量达菌体蛋白的 18%以上 ,目的蛋白具有良好的反应原性。结论　HCVE2基因的克隆与表达为进一步开展HCVE2蛋白和疫苗研究奠定了基础

“人流血”中早孕因子的分离、纯化及鉴定

目的　分离、纯化并鉴定“人流血”中的早孕因子。方法　采用DEAE纤维素离子交换层析 ,S Sepharosefastflow离子交换层析 ,ConA SepharoseCl 4B亲和层析 ,Heparin SepharoseCl 6B亲和层析等方法进行纯化。用花结抑制实验检测出其活性。以SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其肽图。以等电聚焦电泳法检测其等电点。结果　从人流血中分离出EPF活性样物质 ,其蛋白含量为 0 .375mg/ml,SDS PAGE见 1条均匀带 ,其相对分子质量为2 6 5 0 0 ,等电点为 6 .87。结论　本研究提取的早孕因子性质与国内外报道的从妊娠初期孕妇血清中提取的基本一致

MTX-抗体偶联物对单核-巨噬细胞的封闭和杀伤作用

目的　观察静脉注射用免疫球蛋白与免疫抑制剂偶联物对单核—巨噬细胞的杀伤作用 ,为其临床治疗ITP奠定实验基础。方法　分别用间接和直接交联法将IVIG与MTX制备成偶联物 ,用间接免疫荧光法检测偶联物Fc段结合活性 ,以Fc受体阳性的小鼠巨噬细胞和人单核细胞白血病细胞株U937为靶细胞 ,用MTT法测定偶联物的杀伤活性。结果　偶联物对巨噬细胞的杀伤作用明显大于游离MTX ;偶联物对Fc受体阳性细胞的杀伤作用明显大于Fc受体阴性细胞。间接偶联物IVIG HSA MTX杀伤作用明显高于直接偶联物IVIG MTX。结论　MTX抗体偶联物在体外对单核—巨噬细胞显示了相对特异的杀伤活性

人源型可溶性胶原的研制

目的　寻找人面部或体表软组织病变或缺损造成凹陷的填充和修复材料。方法　从胎盘中提纯可溶化性胶原 ,并经动物实验进行观察。结果　在动物皮内可较长期存在而不改变形态 ,且未检出相应抗体 ,也未引起过敏反应 ,组织形态学观察未见明显异常。结论　此胶原制剂是一种安全、有效的生物填充材料

人用精制Vero细胞狂犬病疫苗的稳定性

美兰光化学法对红细胞膜的影响

目的　观察美兰光化学法灭活红细胞制品中病毒对红细胞膜的影响。方法　在离体条件下 ,观察光化学处理后单线态分子氧对红细胞膜结构及组分的影响。结果　经光照灭活病毒后 ,红细胞膜脂质流动性 ,膜蛋白组分及含量与对照红细胞相比差异无显著意义 ,而膜脂过氧化酶含量与对照红细胞相比差异有显著意义。结论　光化学处理对人红细胞膜具有一定的损伤

不同品系SPF鸡胚细胞对S191株麻疹病毒的适应性和敏感性比较

目的　了解我国现有SPF鸡蛋对我国S191株麻疹病毒的可利用性。方法　比较S191株麻疹病毒 ,在我国 3个SPF种蛋供应厂商的 5个品系、6种SPF鸡蛋成纤维细胞上的细胞生长、病变特征和病毒效价方面的差异。结果　LOHMAN F、LOHMAN M、SPAFAS品系SPF鸡蛋的细胞生长发育形态和细胞病变较好 ,其中以SPAFAS为最佳 ;病毒效价 ,SPAFAS和LOHMAN M系在大于 5 .0 0LogCCID50 /ml的高滴度区间的样本数分别达 70 %和 71.96 % ,其中LOHMAN M系的样本都在 4.38LogCCID50 /ml以上的较高水平。结论　我国SPF鸡蛋的SPAFAS和LOHMAN M品系均适宜于S191株麻疹病毒的培养及麻疹疫苗生产

伤寒Vi多糖原液及疫苗的稳定性

目的　观察伤寒Vi多糖原液及其疫苗的稳定性。方法　将多糖原液和疫苗分别放不同温度下 ,并于不同时间取样测KD≤ 0 .2 5时多糖的回收率。结果　原液放 - 2 0℃以下保存 6年后 ,多糖回收率与放置前基本相同 ,均 >5 0 % ;疫苗放 2～ 8℃保存 47个月多糖回收率与放置前基本相同 ,均 >5 0 % ;疫苗放 37℃ ,可保存 40天。结论　伤寒Vi多糖原液和疫苗均具有良好的稳定性

致敏豚鼠接种卡介苗后的临床反应及病理变化

目的　观察致敏豚鼠接种卡介苗后临床反应及病理变化。方法　冻干BCG接种经BCG致敏的和未经BCG致敏的正常豚鼠 ,观察接种后的反应及肝、脾、肺和肠系膜淋巴结的病理变化。结果　未致敏豚鼠局部未出现迟发型变态反应及全身反应 ,致敏豚鼠局部出现迟发型变态反应及坏死 ;两组豚鼠接种后均出现上皮样细胞肉芽肿病理改变。结论　两组豚鼠接种后虽临床反应不同 ,但病理改变无差异

夫妻血型不合的孕妇和未孕妇血清中抗A(B)抗体检测

蛇毒的研究及应用进展