- 郑坚,唐彩华,邓红英,沙健,胡巧玲,吴杰,曹瑞瑶,朱家鸿
经实验研究证明狂犬病毒街毒株SBD0 7株具有较好的免疫原性后 ,通过RT PCR法 ,克隆了该毒株的糖蛋白 (G)基因 ,并进行了全序列测定。结果表明该株狂犬病毒G基因与疫苗株 (aG株 )的核酸及蛋白同源性分别为 85 8%和 88 5 %。以痘苗病毒为载体成功地表达了该基因 ,经小鼠实验表明能诱生较高滴度的狂犬病毒中和抗体 ,并能保护狂犬病毒致死量的攻击
1999年03期 129-132页 [查看摘要][在线阅读][下载 50k] [下载次数：114 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：13 ] |[阅读次数：0 ] - 1999年03期 132页 [查看摘要][在线阅读][下载 10k] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 黄诚,吴文鹃,王家彩,周海涛,饶惠,宋红,李忠明,郭盛淇
应用PCR技术直接从破伤风芽孢杆菌质粒DNA中扩增出 1 4Kd的破伤风毒素C片段基因 ,经DNA序列测定证明其为破伤风片段C基因。将此基因克隆入大肠杆菌谷胱甘肽 S 巯基转移酶融合表达载体pGEX 4T 2 ,构建成重组表达质粒pGEX TC。经SDS PAGE蛋白电泳鉴定 ,表达产物为 76Kd的特异性重组蛋白。免疫印迹实验证实 ,重组蛋白抗原是破伤风C片段抗原。动物实验证明此重组抗原具有良好的免疫原性 ,1μg免疫剂量可使动物产生 1～ 2IU/ml的破伤风抗毒素 ,ELISA抗体滴度可达 1∶80 0。
1999年03期 133-135页 [查看摘要][在线阅读][下载 53k] [下载次数：78 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 朱进,张云,郭恒彬,李先富,潘秀珍,唐家琪,高春芳,李冬辉
采用重叠延伸拼接法 (SOE)连接抗CD3 抗体的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (VK)基因 ,构建单链抗体基因 (ScFv)并将其克隆于含Tac启动子质粒中 ,用斑点杂交法筛选出重组子 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 )并诱导其表达
1999年03期 136-138页 [查看摘要][在线阅读][下载 44k] [下载次数：57 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 1999年03期 138页 [查看摘要][在线阅读][下载 16k] [下载次数：7 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 刘立华,杨贵贞,齐名,杨毓华,武建国
以超声震荡及高速离心法裂解空泡毒素基因阳性 (VacA+ )HP临床分离株 ;采用Hela细胞体外培养法分析此HP菌体蛋白的细胞毒活性及其免疫产卵母鸡制备的IgY抗体的保护作用。HP菌体抗原制备物经SDS PAGE显示至少有十余个蛋白区带 ,主要区带位于约 940 0 0和 6 70 0 0。以此HP菌体抗原包被的ELISA显示 ,球部溃疡患者血清IgG抗体滴度明显增高。体外培养中HP菌体蛋白制备物对Hela细胞具有明显的细胞毒活性 ,LD50 小于 12 μg/ml。以此抗原免疫产卵母鸡 ,提取的IgY抗体浓度依赖地阻断HP菌体蛋白的Hela细胞毒活性 ;提示局部应用抗体制剂做被动免疫 ,有可能成为治疗HP感染性疾病的有效方法
1999年03期 139-141页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k] [下载次数：70 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 崔玉丹,任东鲜,玄凤花,金学军
用耐缺氧实验、全脑缺血实验、小鼠水迷宫实验和小鼠脑组织的MDA含量及SOD活性的测定 ,观察了自制犬胎脑注射液对脑功能的影响。结果表明 ,犬胎脑注射液能显著地对抗氰化钾所引起的组织缺氧 (P <0 0 1) ,明显延长断头后小鼠呼吸维持时间 (P <0 0 0 1) ,明显改善酒精引起小鼠记忆再现障碍 (P <0 0 0 5 ) ,明显降低小鼠脑组织MDA含量 (P <0 0 0 1)和提高SOD活性 (P <0 0 0 1)。
1999年03期 142-144页 [查看摘要][在线阅读][下载 27k] [下载次数：21 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 郭中平,孙丽惠,杨琳,何勤,黄凤琼,张凌燕1999年03期 144页 [查看摘要][在线阅读][下载 9k] [下载次数：56 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 郭仁,陈淑范,罗其胜,王庆玲,易红昆,詹琼芬
选用Ⅲ型脊髓灰质炎病毒 ,3批活疫苗样品 (WHO/Ⅲ ,参考疫苗 ;93/ 36 3和 3J 2批猴体神经毒力实验不合格的疫苗 )和 1株标准强毒株 (Leon) ,脊髓内注入携带有人细胞脊髓灰质炎病毒受体基因的转基因小鼠 (PVRTg2 1)。临床观察和组织病理学检查表明 ,Leon病毒的毒力极强 ,2 .0LogTCID50 可使 10 0 %小鼠麻痹和死亡。WHO/Ⅲ参考疫苗毒力最弱 ,5 .5LogTCID50 才能使 81.7%小鼠麻痹和 5 1.7%小鼠死亡。另 2种疫苗样品的毒力都高于参考制品。各项观察指标随毒力的不同而有明显差别 ,与猴体神经毒力实验结果一致。证明PVRTg2 1小鼠可以用作评价脊髓灰质炎活疫苗毒力试验的动物模型 ,也可用于病毒学和流行病学研究
1999年03期 145-148页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k] [下载次数：185 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 石晓丽,万里,王东倩,刘景会,周华,盛君,郝维杰
重组α2b型人干扰素 (rIFN 2b)PBV889/JM10 3工程菌菌株传 10 0代后 ,经一系列检定表明 ,干扰素表达水平、质粒性状及其遗传稳定性、染色特性、菌落形态、电镜检查及其他理化特性均与原始菌种差异无显著意义 ,且无支原体及其他微生物污染 ,因此仍可作为生产用菌种
1999年03期 149-150页 [查看摘要][在线阅读][下载 36k] [下载次数：259 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：0 ] - 姜典才,李修兰,尹红章,李德富
利用猪鼻 (mhy)、肺炎 (mp)支原体作为免疫原 ,采用杂交瘤技术建立 7株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞。所分泌的抗体用ELISA法检测与Mo、Ma、Mhy、Al及Mp 5种支原体的反应性 ,其中甲H5和丁D3细胞所分泌的抗体与 5种支原体均发生反应。表明这两种抗体是针对 5种支原体共同抗原的 ;以丁D3抗体作为一抗 ,采用间接荧光法分别检测 5种支原体感染的Vero细胞均为强阳性 ,其敏感性高于培养法 ,与DNA染色法相当 (2 0 0个 /ml) ;以甲H5抗体为包被抗体 ,丁D3抗体为酶标抗体 ,采用双抗体夹心法检测培养上清中支原体敏感性为 12 5ng/ml。用两种方法检测 2 0份支原体阳性细胞株 ,10份阴性细胞株标本 ,结果间接荧光法显示 2 0份阳性标本全部为阳性 ,10份阴性标本 1份为阳性 ;双抗体夹心法 2 0份阳性标本中 10份为阳性 ,10份阴性标本全部为阴性
1999年03期 151-152+191页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k] [下载次数：74 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 王剑锋,李长贵,邱平,周铁群,沈月雷
应用两种在pTrcHis上表达的融合蛋白rp15 0C和rp5 2C免疫BALB/c小鼠后 ,获得 2株分泌抗pTrcHis载体蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞 1C4和 3C10。其中 1C4为IgG3 ,腹水ELISA效价为 1∶2× 10 6;3C10为IgM ,腹水ELISA效价为 1∶6 0 0。实验表明 ,1C4分泌的抗体用于pTrcHis表达蛋白的检测具有很好的特异性 ,对工程菌体蛋白无非特异性反应。辣根过氧化物酶HRP标记 1C4后 ,用于组装HCMVIgM检测试剂盒 ,检测HCMVIgM阳性血清 ,得到了满意的结果
1999年03期 153-154页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k] [下载次数：138 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：0 ] - 徐诗嘉,刘海雄,汪超英,曹剑峰,林娜,徐星培
本文建立了一种新型免疫试剂SPG的制备方法 ,该方法是从链球菌G148菌株的细胞壁中提取SPG ,用木瓜蛋白酶消化 ,再经离子交换层析、亲和层析法提纯精制。用ELISA法检测活性 ,用SDS PAGE检测纯度和相对分子质量
1999年03期 155-158页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k] [下载次数：194 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：8 ] |[阅读次数：0 ] - 牛瑞芳,黄建英,李希1999年03期 158页 [查看摘要][在线阅读][下载 9k] [下载次数：95 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 沈琦,王威,刘大英
应用TPO依赖细胞株检测rHu TPO体外生物学活性。将TPO标准品和样品分别稀释到一定的浓度 ,加入到 96孔细胞培养板中 ,每孔加入TPO依赖细胞 ,在 37℃CO2 孵箱中培养 48h后 ,加入一种四唑化合物 ,再培养6± 2h ,在 492nm波长下测A值。用TPO标准品做对照。根据剂量反应平行线法 ,计算出样品相对的体外生物学活性。该方法重复性好 ,回收率高 ,便于推广应用
1999年03期 159-161页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k] [下载次数：87 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ] - 1999年03期 161页 [查看摘要][在线阅读][下载 7k] [下载次数：15 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 刘华平,李方跃,梁伟,徐阿曼,肖尚喜
采用多聚酶链 限制性片段长度多态性检测技术 ,对临床上可疑的胰腺炎和胰腺癌患者 ,经收集胰液进行K ras基因第 12位密码子突变检测 ,以诊断或鉴别诊断胰腺癌。结果在 2 2份胰液标本中 ,11例胰腺炎均无K ras基因突变 ;在 11例胰腺癌病例中有 9例 (81 2 % )含K ras基因突变
1999年03期 162-164页 [查看摘要][在线阅读][下载 34k] [下载次数：100 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：0 ] - 1999年03期 164页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 刘佐民,贺争鸣,卫礼,张然,吴惠英
从R3 克隆中提取并纯化流行性出血热R2 2 株M片段cDNA ,用光敏生物素标记而制备出生物素化的cDNA探针。用此探针与R2 2 株、76 118株及R3 克隆进行斑点杂交 ,均出现阳性杂交信号 ,而与仙台病毒、鼠肺炎病毒及BALB/c小鼠肝细胞、Vero E6细胞和SP2 / 0细胞杂交均为阴性。探针的灵敏度为 2 5pg目的核酸。用此探针测定了来自 9个单位 12株人用鼠源性杂交瘤细胞和 7个单抗制剂均为阴性。该结果与血清学检验结果一致
1999年03期 165-166页 [查看摘要][在线阅读][下载 34k] [下载次数：22 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 丁志芬,庞成华,赵敏,石慧颖,杨抗抗,李荆,陈明,常振彦
通过试验研究和生产实践 ,将腮腺炎减毒活疫苗生产工艺中细胞长成单层后接种病毒 ,改为细胞和病毒同时接种 ;收获病毒前置 4℃冷释放改为不释放 ,直接收获病毒 ;一批细胞收获一次病毒改为多次收获病毒 ;克氏瓶静置培养改为 15L瓶旋转培养等 ,使疫苗生产周期由 8d缩短为 6d ;生产工序由 6道减少为 4道 ,从而降低了染菌率和生产成本 ,稳定了质量 ,产量也有明显提高
1999年03期 167-169页 [查看摘要][在线阅读][下载 23k] [下载次数：193 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 柴德芬,赵宠祥1999年03期 169页 [查看摘要][在线阅读][下载 8k] [下载次数：23 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 刘景晔,王美桦,薛勇,王玮,刘令九,屈翠波,谢宝生,于世伟,李玉红
采用细胞消化传代同时加疫苗病毒感染细胞的方法 (简称同时感染法 )与细胞长成单层后再加病毒感染细胞的方法 (简称单层感染法 )所制备的疫苗进行质量比较 ,结果同时感染法的生产周期明显缩短 ,病毒达增殖高峰期的细胞仍能保持良好的形态 ,疫苗病毒滴度明显提高。表明该工艺更适合于规模化、工业化生产
1999年03期 170-171页 [查看摘要][在线阅读][下载 19k] [下载次数：146 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 李娟,李文波,张耀庭,郑晓丽
采用日立 835型氨基酸组分分析仪测定了生物制品培养基常用蛋白胨的氨基酸含量 ,结果表明 ,氨基酸总量由高到低依次为厚氏消化液、盐酸水解酪蛋白液、酪蛋白胰酶消化液、黄豆蛋白酶水解液 ;必需氨基酸总量由高到低依次为厚氏消化液、酪蛋白胰酶消化液、盐酸水解酪蛋白液、黄豆蛋白酶水解液
1999年03期 172-173页 [查看摘要][在线阅读][下载 16k] [下载次数：681 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ] - 刘东辉,万宗举,高佳梅,张华远,王瑞,李河民1999年03期 173页 [查看摘要][在线阅读][下载 7k] [下载次数：40 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ]
- 1999年03期 173页 [查看摘要][在线阅读][下载 7k] [下载次数：7 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 王金成,刘佐庆,许则民,朱庆三,姜鸿志,冯琳琳,尤彦德
取成人腰间盘纤维环 ,采用Blanckaert法提取胶原酶 ,用底物消化法检测胶原酶活性 ,结果表明 ,正常成人腰间盘纤维环上下位间胶原酶活性差异无显著意义 ,在此基础上还确定了正常值范围
1999年03期 174-175页 [查看摘要][在线阅读][下载 15k] [下载次数：40 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 高韦娟,李春怀,梁志学,刘丽华,陈维金,聂荣国,杨红育
采用大剂量丙种球蛋白 (IVIg)对 2 8例自身免疫性溶血性贫血 (AIHA)患儿进行了临床疗效观察 ,结果在改善症状、体征及实验室检测指标等方面均明显优于对照组 ,且无复发病例
1999年03期 176-177页 [查看摘要][在线阅读][下载 17k] [下载次数：30 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 涂光理,崔长法,王建阳,傅炳南,张文平,张怀谨,刘明欣,何国占,杜琳,靳志刚,李生迪,宋树珍,王秉瑞
将 2 6 2 30人随机分为 3组 ,分别服用高剂量、低剂量口服痢疾活疫苗FS和安慰剂 ,观察安全性和保护效果 ,由结果可以看出 ,FS菌苗安全可靠。在半年的观察期内 ,能产生 6 2 76 %的对FS型保护 ,其中对福氏 2a保护率 6 1 0 7% ,宋内氏保护率 72 48% ,对菌痢的总保护率达 5 2 0 2 % ,高、低剂量两组之间保护率差异无显著意义
1999年03期 178-180页 [查看摘要][在线阅读][下载 31k] [下载次数：65 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：12 ] |[阅读次数：0 ] - 董关木,刘增顺,郑海发,曲小素,刘景华,俞永新,李守江,董丽君,李雅丽,刘玉华,杜鹃,何世伟,查丽,周得水
为提高狂犬病疫苗的质量 ,对辽宁生物技术公司生产的精制地鼠肾细胞狂犬病疫苗进行了临床观察 ,经过第Ⅰ阶段 35人和第Ⅱ阶段 310人的暴露前和暴露后注射的观察 ,结果显示仅有轻微的副反应 ,无中、强度反应 ,总反应率 2 0 % (7/35 ) ,低于法国维尔博疫苗的 30 30 % (10 /30 )。无论是暴露前或暴露后注射 ,全程注射后抗体阳转率均为 10 0 % ,中和抗体GMT为 4 17～ 12 0 1IU/ml。该疫苗不仅副反应轻微 ,而且免疫原性良好
1999年03期 181-183页 [查看摘要][在线阅读][下载 27k] [下载次数：83 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：0 ] - 1999年03期 183页 [查看摘要][在线阅读][下载 10k] [下载次数：7 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 汪兴太,李德富1999年03期 184-186页 [查看摘要][在线阅读][下载 28k] [下载次数：39 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ]
- 王家强,王焱旻,孙文涛,邢德君,迟晓峰1999年03期 186页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k] [下载次数：13 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：0 ]
- 王妍,张兴义1999年03期 187-191页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k] [下载次数：1154 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：21 ] |[阅读次数：0 ]
- 王钢1999年03期 192页 [查看摘要][在线阅读][下载 13k] [下载次数：40 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：0 ]
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