- 江滢;郝月茹;任惠文;季文恒;赵玉秀;汪运洋;
目的 探讨无定形羟基磷酸硫酸铝（amorphous aluminum hydroxyphosphate sulfate,AAHS）和氢氧化铝佐剂对重组乙型肝炎（简称乙肝）表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）的吸附机制以及不同吸附率对乙肝效价的影响。方法 通过朗格缪尔（Langmuir）吸附方程计算不同氯化钠（NaCl）、乙二醇浓度下，HBsAg在AAHS和氢氧化铝佐剂表面的最大吸附量，结合不同浓度磷酸盐对HBsAg吸附效果的影响，分析参与HBsAg和两种铝佐剂吸附的主要作用力，同时比较两种佐剂之间的差异。采用ED_(50)来评估不同磷酸盐浓度样品的免疫效果，分析不同吸附率与效价之间的关系。结果 不同浓度NaCl和乙二醇不影响两种佐剂对HBsAg的吸附率，其吸附率随磷酸盐浓度的上升而下降，吸附率较低的样品效价仍在合格标准范围内。结论 HBsAg主要通过配体交换吸附在AAHS和氢氧化铝佐剂表面，乙肝效价可能不需要高的体外抗原吸附率。
2025年05期 v.38 513-520页 [查看摘要][在线阅读][下载 940K] [下载次数：6 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 徐康维;许丽;鲁旭;李晶;戈小琴;王开芹;李长贵;权娅茹;
目的 评价原型株SARS-CoV-2灭活疫苗免疫BALB/c小鼠后对Delta株病毒的体液及细胞免疫效果，为现有疫苗对变异株的保护效果评价以及研发更加安全有效的疫苗提供参考。方法 将SARS-CoV-2灭活疫苗经腹腔免疫雌性BALB/c小鼠2次，间隔14 d，以免疫PBS作为对照，每组10只。初次免疫后第7、14、21、28、35和42天采集血清，间接ELISA法检测血清中针对Delta株病毒S和N蛋白的结合抗体效价，微量中和试验检测针对Delta株病毒的中和抗体效价。初次免疫后第42天，取小鼠脾脏，进行Elispot检测，评价细胞免疫水平。结果 初次免疫后第7天即可检测到S蛋白结合抗体，加强免疫后抗体效价进一步升高，至第21天抗体几何平均滴度（geometric mean titer,GMT）为89 144；而初次免疫后N蛋白结合抗体水平较低，加强免疫后迅速升高，与S蛋白抗体水平相当。初次免疫后第7、14天小鼠中和抗体阳转数为4/10和8/10，加强免疫后全部小鼠抗体阳转，中和抗体GMT达391。初次免疫后第42天，疫苗组IFNγ和IL-2平均斑点数均显著高于对照组（t分别为8.094和13.08,P均<0.000 1）。结论 SARS-CoV-2灭活疫苗2次免疫能够有效刺激小鼠产生针对Delta株病毒的体液免疫和细胞免疫。
2025年05期 v.38 521-525页 [查看摘要][在线阅读][下载 862K] [下载次数：3 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：42 ] - 陈娜娜;苗会;拱小棠;张冬雪;刘振成;孙宏亮;张颖;李景良;
目的 评价预灌封注射器森林脑炎灭活疫苗（0.5 mL/剂）的稳定性，以确保产品的有效性和安全性。方法 将优化后（0.5 mL/剂，预灌封注射器）森林脑炎灭活疫苗原液于（5±3）℃保存120 d，检测无菌性、抗原含量、蛋白质含量、牛血清白蛋白残留量、地鼠肾细胞蛋白质残留量等指标，并与优化前（0.1 mL/剂，西林瓶）进行比较。根据《生物制品稳定性研究技术指导原则》的相关要求对优化后森林脑炎灭活疫苗成品分别进行长期稳定性（2~8℃放置0~33个月）、加速稳定性[（25±2）℃放置0、3、6个月]及加速破坏稳定性[（37±1）℃放置0、7、14 d]检测，包括外观、效价、铝含量、渗透压摩尔浓度等指标。结果 优化前后森林脑炎灭活疫苗原液各项指标检测结果均合格，其中牛血清白蛋白残留量、地鼠肾细胞蛋白质残留量差异均无统计学意义（F分别为3.33和0.61,P分别为0.077和0.627），蛋白质含量差异有统计学意义（F=38.07,P<0.05），但均在≤80μg/mL标准范围内。优化后森林脑炎灭活疫苗成品长期稳定性、加速稳定性及加速破坏稳定性各项指标检测结果均合格，其中在长期稳定性检测中，优化后疫苗效价显著高于优化前（F=62.32,P<0.05）；在长期稳定性检测中，渗透压摩尔浓度变化差异有统计学意义（F分别为40.47和12.50,P均<0.05），但其波动均控制在240~320 mOsmol/kg的标准范围内。结论 预灌封注射器森林脑炎灭活疫苗（0.5 mL/支）在长期储存、运输及短期超温条件下均具有良好的稳定性，质量符合标准。
2025年05期 v.38 526-530页 [查看摘要][在线阅读][下载 846K] [下载次数：1 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 曹晴;门运政;张艳玲;刘晓雅;荣欢;佘广彪;吴常伟;黄恩启;
目的 评价多价重组受体结合域（receptor-binding domain,RBD）二聚体蛋白疫苗对SARS-CoV-2变异株的交叉中和作用，以期为广谱SARS-CoV-2疫苗的研发提供实验依据。方法 将22只雌性SD大鼠随机分为ZF2202(B)(8只)、ZF2202(A)(6只)及生理盐水对照（8只）组，分别于0、21、42 d经肌内进行免疫，0.25 mL/只。末次免疫后14 d，采用假病毒中和试验检测ZF2202(B)及ZF2202(A)组大鼠血清对假病毒Delta、BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1、EG.5及BA.2.86的中和抗体水平，ELISpot法分析ZF2202(B)及生理盐水对照组大鼠脾淋巴细胞分泌IFNγ和IL-4的能力。结果F2202(B)组大鼠血清对假病毒BA.4/5、BQ.1.1、XBB.1、EG.5和BA.2.86的中和抗体水平均明显高于ZF2202(A)组（U分别为3、1、1、1、0,P分别为0.004 7、0.001 3、0.001 3、0.001 3、0.000 7）；与生理盐水对照组比较，ZF2202(B)组大鼠脾淋巴细胞分泌IFNγ的特异性斑点数明显增多（U=4,P=0.001 4）,IL-4的特异性斑点数也明显增多（t=3.775,P=0.002 1）。结论 ZF2202(A)和ZF2202(B)对SARS-CoV-2变异株均具有交叉免疫保护作用，但ZF2202(B)对现流行株的保护效果优于ZF2202(A)，具有更好的广谱效果。
2025年05期 v.38 531-535页 [查看摘要][在线阅读][下载 863K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]
- 赵冬梅;邱璐;张旭;高贤娴;周洋洋;于莉莉;李帅;
目的 建立一种结晶紫-甲基纤维素噬斑减少中和试验检测蜱传脑炎病毒（tick-borne encephalitis virus,TBEV）中和抗体滴度的方法，并对方法进行验证及初步应用，以期为TBEV抗体产品在活病毒中和效价检测方面提供可靠的手段。方法 采用正交试验设计确定试验所涉及的重要参数（病毒培养时间、病毒-细胞孵育时间、病毒-抗体中和温度、甲基纤维素浓度）的最优试验条件；根据确定的试验参数对该方法进行专属性、相对准确度和线性、重复性、中间精密度验证；应用建立的方法进行森林脑炎灭活疫苗免疫人群血清中和抗体滴度的检测。结果 确定最优试验条件为：病毒培养时间5 d、病毒-细胞孵育时间1.5 h、病毒-抗体中和温度37℃、甲基纤维素浓度3%，在该条件下可形成清晰的圆形噬斑，便于计数。专属性验证稀释供试品组和加速破坏供试品组均能检测出中和抗体，检测结果均≥10，杂质组检测结果 <10；相对准确度每个效价测定值的相对偏倚为0~10%，均在±12%范围内，线性回归相关系数（r）为0.999 3，大于0.98；重复性和中间精密度验证每组样本的几何变异系数（geometric coefficient of variation,GCV）在1.5%~4.1%之间，不大于20%；森林脑炎灭活疫苗免疫人群血清免疫前中和抗体滴度<10，初次免疫后和加强免疫前、后中和抗体滴度均≥10，且加强免疫后血清中和抗体均有所增加。结论 建立的TBEV中和抗体滴度检测方法具有较好的耐用性、专属性、相对准确度和线性及精密度，且结果易于判定，可用于TBEV中和抗体滴度的检测。
2025年05期 v.38 574-580页 [查看摘要][在线阅读][下载 923K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 张婷;周长明;沈琮;邵天舒;丁锐;
目的 建立血浆源性人凝血因子Ⅷ（plasma-derived FⅧ，pdFⅧ）制品中钙含量的原子吸收分光光度检测方法，并评价方法的不确定度，以期为血液制品中钙含量的检测提供可靠方法。方法 pdFⅧ中添加电离抑制剂氯化镧后，采用原子吸收分光光度法检测钙含量，并优化方法中的燃气流量（1.2、1.4、1.6、1.8、2.0 L/min）、燃烧器高度（9、11、12、13 mm）、灯电流（100%、90%、85%、80%）、狭缝宽度（0.2、0.5、1.0 nm），验证方法的专属性、线性范围、检测限及定量限、准确性、精密性、稳定性。采用建立方法检测6批pdFⅧ供试品中钙含量。评价方法的不确定度，并以批号为202404026的pdFⅧ供试品为例，测定钙含量，确定各不确定度来源对检测结果的影响。结果 确定最佳燃气流量为1.8 L/min，燃烧气高度为12 mm，灯电流为85%，狭缝宽度为0.5 nm。氯化镧不干扰pdFⅧ中钙含量的测定；钙工作标准液在1.0~5.0μg/mL浓度范围内，与A_(422.7)呈良好的线性关系，回归方程为：y=0.016 6 x-0.000 8,r=0.998 7；检测限为0.127 2μg/mL，定量限为0.385 5μg/mL；低、中、高浓度加标样品的回收率均在85%~110%范围内；精密性及稳定性验证RSD均<2%。6批pdFⅧ供试品的钙含量均≤50μg/mL。不确定度主要来源于标准溶液的制备，批号为202404026的pdFⅧ供试品钙含量为（42.11±1.736 1）μg/mL，符合规定（≤50μg/mL），表明各不确定度来源对钙浓度检测结果未产生影响。结论 建立的原子吸收分光光度法具有良好的准确性、精密性及稳定性，且通过不确定度评价确保了检测结果的可靠性，可用于pdFⅧ中钙含量的准确测定。
2025年05期 v.38 581-587页 [查看摘要][在线阅读][下载 892K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 路晶晶;霍丽楠;
目的 利用纳升超高效液相色谱-质谱联用技术（nano ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spec-trometry,Nano-UPLC-MS/MS）及酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）分析贝伐珠单抗注射液及其下游工艺产品中宿主细胞蛋白（host cell protein,HCP）残留。方法 将样品直接采用胰蛋白酶处理后，热处理沉淀未被消化的抗体，经Nano-UPLC串联Q-Exactive四极杆-轨道阱组合高分辨质谱仪进行检测，利用MaxQuant软件将采集的肽段信息与中国仓鼠全蛋白库进行比对，鉴定HCP种类；双抗体夹心ELISA法检测样品吸光度值，根据四参数曲线计算HCP含量。结果 经过下游工艺纯化，HCP含量及种类显著降低；注射液中HCP含量为7 ppm，种类为20种，检测到5种持久残留HCP,4种高风险HCP未检出；与原研药对比，二者HCP残留量均≤15 ppm，由于纯化工艺不同，HCP种类存在差异。结论 Nano-UPLC-MS/MS与ELISA法结合为HCP的表征和定量，尤其是持久残留HCP和高风险HCP的类型及分布，提供了全面的分析策略，可为产品的工艺优化、可比性研究和安全风险评估提供参考。
2025年05期 v.38 588-594+604页 [查看摘要][在线阅读][下载 911K] [下载次数：5 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 卜祥利;孙也婷;张立志;赵冉;林纪胜;李晶;王淼;
目的 建立基因脱毒百日咳疫苗菌株改造基因百日咳毒素（pertussis toxin,PT）的拷贝数双重TaqMan探针qPCR检测方法，筛选最佳内参基因，以评估改造菌株的传代稳定性。方法 设计改造基因PT和多个管家基因的特异性引物及探针，基于双重TaqMan探针qPCR法，使用GeNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta CT软件筛选最佳内参基因，通过相对定量法计算基因脱毒百日咳疫苗菌株PT目的基因拷贝数；对建立的方法进行特异性、线性、重复性验证。以基因脱毒百日咳疫苗生产用P1、P3、P5、P10、P15代菌株基因组DNA为模板，用建立的双重TaqMan探针qPCR法评估菌株传代稳定性。结果 通过GeNorm、NormFinder、Bestkeeper、Delta CT软件分析内参基因稳定系数得出Rpob为最适内参基因。标准菌株58003既能扩增出PT目的基因，又能扩增出Rpob内参基因；样品浓度在0.001~10 ng/μL范围内，Ct值与样本量呈良好的线性关系，R~2≥0.990;P1代菌株6次检测2~(-△△Ct)值均在0.87~1.25之间，RSD小于20%。各代次菌株PT目的基因均为单拷贝，传代稳定性良好。结论 建立的双重TaqMan探针qPCR法引物特异性、重复性好，可用于基因脱毒百日咳疫苗生产用菌株的传代稳定性评估，进而评价菌株质量。
2025年05期 v.38 595-604页 [查看摘要][在线阅读][下载 1073K] [下载次数：6 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ]
- 张博;苏媛;哈小琴;
血栓性疾病严重威胁人类生命健康，临床发病率高居各类疾病之首，是当代医学研究的重点和热点之一。深静脉血栓（deep vein thrombosis,DVT）作为血栓性疾病的一类，近些年发病率呈上升趋势。目前临床对于DVT的治疗手段较少，且多在于缓解症状，不能根治。因此，寻找高效防治DVT的新方法具有十分迫切的现实意义。研究显示，间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）在DVT的治疗中发挥重要作用，具有广阔的应用前景。本文就MSCs在DVT治疗中相关作用机制的研究进展作一综述，以期为DVT的治疗提供新的思路和方法。
2025年05期 v.38 605-609+616页 [查看摘要][在线阅读][下载 871K] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 胡楠;王财;常月立;张玉妥;
不可分型流感嗜血杆菌（non-typeable Haemophilus influenzae,NTHi）是一种无荚膜的革兰阴性球杆菌，广泛定植于人类上呼吸道，可在免疫力低下时引起侵袭性感染。近年，随着b型流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae type b,Hib）疫苗的普及，NTHi已成为流感嗜血杆菌感染的主要致病型别，其临床分离率在全球范围内呈上升趋势，且对β-内酰胺类等抗生素的耐药性日益增强。NTHi常与肺炎链球菌、卡他莫拉菌等病原体形成混合感染，通过生物膜形成、免疫逃逸等机制导致中耳炎、脑膜炎、慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）急性加重等。目前，抗生素仍是治疗NTHi感染的主要药物，但耐药性问题促使疫苗研发成为重要研究方向。基于外膜蛋白及黏附素等抗原开发的候选疫苗已显示出良好的免疫原性和保护效果，但仍需进一步优化以提高交叉保护作用。本文就NTHi的流行现状、相关疾病及疫苗研究进展作一综述，以期为NTHi感染的防控提供参考。
2025年05期 v.38 610-616页 [查看摘要][在线阅读][下载 906K] [下载次数：2 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 高健;周柏松;刘玉林;刘景会;
干扰素（interferon,IFN）是一类具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能的糖蛋白，根据结构和受体差异分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。其中，Ⅲ型IFNs(IFNλs)包括IFNλ1(IL-29)、IFNλ2(IL-28a)和IFNλ3(IL-28b)，其受体分布具有组织特异性，主要表达于上皮细胞和部分免疫细胞，因此副作用较Ⅰ型IFN更少。IFNλs可通过JAK/STAT信号通路诱导IFN刺激基因（interferon-stimulated genes,ISGs）表达，发挥抗病毒作用，并能抑制肿瘤细胞增殖、促进凋亡，同时调节免疫反应。近年，重组IFNλs药物的研发取得进展，如聚乙二醇（polyethyleneglycol,PEG）修饰的长效IFNλ1已进入Ⅲ期临床试验，用于治疗丙型肝炎、丁型肝炎和COVID-19。本文从IFNλs的结构及受体、信号通路及调控、生物学作用及其研究进展作一综述，以期为IFNλs相关产品的研发提供思路。
2025年05期 v.38 617-623页 [查看摘要][在线阅读][下载 1019K] [下载次数：1 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：1 ] - 苏琳佳;许方婧伟;张云涛;
接种疫苗是防控SARS-CoV-2感染最经济有效的手段，为维护全球公共卫生安全，确保人类健康发挥了重要作用。佐剂作为疫苗研发的关键成分，可通过提高免疫应答速度、强度及持久性，弥补抗原免疫原性不足，显著提升疫苗效力，对SARS-CoV-2疫苗免疫效果的提升至关重要。佐剂的类型众多，适配于不同类型的疫苗，如SARS-CoV-2灭活疫苗多采用铝佐剂，重组蛋白疫苗适配复合佐剂，mRNA疫苗则依赖脂质纳米粒（lipid nanoparticle,LNP）递送系统。本文就佐剂的分类及作用机制、在疫苗中的应用及广谱SARS-CoV-2疫苗佐剂的研发新思路作一综述，为制备具有良好安全性和有效性的创新型佐剂提供参考，以期不断提高SARS-CoV-2疫苗免疫效力，应对SARS-CoV-2的不断变异。
2025年05期 v.38 624-629页 [查看摘要][在线阅读][下载 850K] [下载次数：4 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]